02CDNA的复制研讨.ppt

第二章 染色体与DNA 遗传物质的分子结构和性质 基因组和染色体 DNA的复制 DNA损伤与修复 重组和转座 DNA的复制 第一节 半保留复制的验证 半保留模型 (semioconservetive model) 全保留复制模型 (conservetive model) 分散模型 (Dispersive model)。 半保留复制的验证实验 一、Meselson-Stahl实验 (1958) 半保留复制 冈崎实验中的假象 E.coli dUTPase，它能使dUTP变成dUMP，dUMP是不能作为DNA合成的底物，这样它就不再能加入DNA中。 尿嘧啶N-糖苷酶（uracil N-glycosylase），它可以切断混合尿苷的糖苷键，形成无Pu和Py位点（apurinic or apyrimidinic ，AP），再由AP内切酶在AP位点切出一个缺口，进一步进行切除修复。 在dut-突变体（dUTPase缺失）中冈崎片段比在dut+中为短。这是因为U掺入机会增加； 在ung-（尿嘧啶N-糖苷酶缺失）突变体中，新合成的DNA约有一半由片段组成。 因为尿嘧啶N-糖苷酶缺失，不会切除U的糖苷链，也就不会出现AP位点，所以碱沉淀时不易断裂，从而保持了半不连续的原貌。 在dut-, ung-双突变体中，结果和实验（2）相同，更进一步证实了此推测。 二、如何打开超螺旋？