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第六章 革兰阳性球菌 第一节 葡萄球菌属 一、生物学特性： 1、革兰阳性， 球形,，葡萄状排列 2、营养要求不高 3、菌落较大，可有色素，脂溶性 4、可有溶血圈，菌体表面可有SPA 5、触酶阳性 6、甘露醇发酵+ 7、产生血浆凝固酶和毒素。 血浆凝固酶：使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质。意义：①鉴别有无致病性的重要指标。②抵抗吞噬细胞的吞噬。③使化脓性病灶出现典型特点：浓汁粘稠、病灶局限、不易扩散、界限分明。 8、可产生耐热核酸酶 9、抵抗力较强，耐10-15%氯化钠，对碱性染料敏感。 10、?耐药菌株多见 二、分类： 1、按色素分： 金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。 2、按血浆凝固酶有无分类： 血浆凝固酶阳性和血浆凝固酶阴性葡萄球菌。 3、根据噬菌体分型：26型。 三、临床意义： 四.微生物学检验 1、标本采集:应在抗菌药物治疗前采 集细菌增殖部位的标本, 如脓, 血, 脑 脊液, 呕吐物等。 2、直接涂片: 有参考价值。 3、分离纯种: 接种血平板,或高盐平板。根据菌落及镜下形态挑选。 鉴定： 菌落及镜下形态、触酶试验阳性、血浆凝固酶试验阳性、耐热核酸酶试验阳性、甘露醇发酵试验阳性 。 （1）血浆凝固酶试验 玻片法：检测菌体表面的凝固酶。 直接将菌落混于人或兔血浆中,立即观察有无凝固。 试管法：检测菌体外的凝固酶。 培养物和血浆混合，37 o C 4h 后观察结果。 （2）耐热核酸酶试验 在含核酸甲苯胺蓝平板上打孔；培养物沸水浴15min后加入孔中；35℃ 1h 观察结果。甲苯胺蓝变为红色者为阳性?? ? 4、肠毒素检测：病人分离株培养物，煮沸30min，接种幼猫腹腔，4小时内出现症状为阳性。 第二节 链球菌属 一、生物学特性 1、革兰阳性，球形，呈链状排列。 2、多数在培养早期有荚膜。 3、营养要求高, 需血液或血清 4、血平板上形成灰白色、小菌落。 5、血平板上分别形成α、β、γ三种特征性溶血现象。 6、触酶阴性 7、可产生透明质酸酶等多种酶：扩散因子是浓汁稀薄，病灶扩散，病灶界限不清。 8、可产生多种毒性物质 9、抵抗力较差，耐药菌株少见。 二、分类 1、按溶血情况分 乙型溶血链球菌:致病力强 甲型溶血链球菌:致病力差 丙型溶血链球菌: 无致病力 2、按细胞壁多糖C抗原抗原性分为20群? (A-Z)， 90%病原菌在A群 三、临床意义 四、微生物学检验 n 1、标本采集：主要是咽拭子,脑脊液，痰，脓等。 2、直接涂片：有参考价值。 3、分离纯种：接种血平板，根据菌落及镜下形态挑选。 4、鉴定 （1）菌落及镜下形态 （2）触酶试验阴性 （3）杆菌肽敏感试验：A群敏感。 将0.04U杆菌肽药敏纸片贴在涂布有待测菌的羊血琼脂平板上，35℃ 孵育过夜后，观察抑菌环以判断是否为敏感。＞10mm敏感，＜10mm不敏感。 （4）CAMP试验：B群阳性。 B群链球菌能产生CAMP因子，它可促进葡萄球菌溶血的能力。先将金黄色葡萄球菌沿直径划线接种，再沿该线垂直方向接种 B群链球菌，两线不得相接，间隔0.5cm，37℃ 孵育过夜，两种划线交界处出现箭头状溶血，即为阳性反应。 （5）血清学试验定群：群特异性Ag （6）抗O溶血素试验：活动性风湿热抗体效价＞1:400 五、肺炎链球菌鉴定 1、革兰阳性，个体成对排列，矛尖状，有荚膜。 2、菌落为草绿色溶血，有自溶酶，菌落顶部可下陷（脐窝状）。 3、胆汁溶菌试验阳性：胆盐能通过活化肺炎链球菌的自溶酶而将肺炎链球菌溶解。将0.5ml的麦氏浓度细菌悬液和等量的2%去氧胆盐置于试管内，35oC 孵育2h后， 菌液变清为阳性。 4、对Optochin 敏感：5μg,14mm 六、总结 1、链球菌是人和某些动物的寄生菌。 2、草绿色链球菌为正常菌群的成员, 可 引起内源性感染。 3、A群化脓性链球菌菌落为β溶血,可引 起多种疾病,诊断时,可分离细菌,也可检 测ASO。 4、肺炎链球菌菌落为α溶血,但在生物学 性状和致病性上与绿链有差异。 第八章 肠杆菌科 第一节 概述 一、共同特征 1、可能存在于人和动物肠道的革兰阴性杆菌，有的是正常菌群，有的是病原菌。可引起肠道外或肠道内的感染。临床检出率最高。 2、多有周鞭毛，能运动，有的有菌毛。 3、有H,O,K等抗原。 4、能发酵多种糖，乳糖有鉴别意义。 5、能抵抗胆汁和某些染料。 6、镜下形态几无鉴别意义,鉴定以生化反应和抗原性为主。 二、肠杆菌常用培养基 培养基 鉴别物 抑制物 指示剂 l MAC 乳糖 胆盐 中性红 l EMB 乳糖 伊红美兰