细胞培养例析.ppt

3、为何培养基保存于4 °C 冰箱中， 颜色会偏暗红色， 且pH值会越来越偏碱性？ 培养基保存于4°C 冰箱中， 培养基内之CO2 会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red) 的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果，将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之CO2，以调整pH 值。 4、培养细胞生长减慢可能原因： 由于更换不同培养液或血清 比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清支持细胞生长实验 增加起始培养细胞浓度 培养液中一些细胞生长必需成分如谷氨酰胺或生长因子耗尽或缺乏或已被破坏 让细胞逐渐适应新培养液。换入新鲜配制培养液。补加谷氨酰胺或生长因子 培养物中有少量细菌或真菌污染 用无抗生素培养液培养，如发现污染，丢弃培养物。或用抗生素除菌。 试剂保存不当 血清需保存在-5℃ 到-20℃。培养液需在2－8℃避光保存。含血清完全培养液在2-8℃保存，并在2 周内用完 5、培养细胞不贴壁 胰蛋白酶消化过度 缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度 支原体污染 分离培养物，检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物 培养液中无贴壁因子 6、欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？ 欲回收动物细胞，其离心速率一般为300xg (约1,000rpm)，5 - 10 分钟，