高考冲刺专题五第1讲基因工程与克隆技术.pptVIP

两个核苷酸之间的___________ 作用 部位 携带目的基因进入 _____________ 拼接DNA 片段，形成_________ 切割________ 和载体 作用 载体 DNA 连接酶 限制酶 目的基因 重组DNA 受体细胞 磷酸二酯键 质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等 E·coli DNA 连接酶、T4 DNA 连接酶 EcoR Ⅰ 限制酶 Sma Ⅰ 限制酶 常用类型 ①能在宿主细胞内稳定存在并大量复制 ②有多个___________ ____________ ③具有特殊的_______ _____ ①E·coli DNA 连接酶只能连接 _____________________ ②T4 DNA 连接酶能连接______ ___和平末端 ①识别双链DNA 分子的某种___________ __________ ②在特定位点上切割 作用特点(条件) 载体 DNA 连接酶 限制酶 特定核苷酸 序列 黏性末端 限制酶切割 位点 黏性末 端 标记基 因 目的基因DNA受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在_________ ___作用下延伸 PCR技术扩增 以RNA为模板，在 作用下人工合成 反转录法 已知核苷酸序列的 ，直接利用DNA合成仪用化学方法合成，不需要模板 化学合成 人工合成 从自然界已有的物种中分离，如从_________ 中获取 直接分离 具体操作 方法 基因文库 较小基因 逆转录酶 DNA聚合 酶 原核细胞 _________ 受精卵、体细胞 受体 细胞 ___________法(用Ca2＋处理) _________技术 __________法、 基因枪法、____ _______法 常用 方法 微生物细胞 动物细胞 植物细胞 花粉 管通道 显微注射 感受态细胞 受精卵 农杆菌转化 过程 动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织 植物幼嫩部位 取材 动物细胞培养 植物组织培养 项目 ①蛋白质生物制品的生产 ②皮肤移植材料的培育 ③检测有毒物质 ④生理、病理、药理学的研究 ①植株快速繁殖 ②脱毒植株的培养 ③人工种子 ④生产药物、杀虫剂等 ⑤转基因植物的培育 应用 ①无菌、无毒 ②营养，血清等 ③温度和pH ④气体环境：O2、CO2 ①无菌 ②营养 ③适宜条件 条件 新的细胞，不形成个体，不体现全能性 获得植株个体，可以体现全能性 结果 动物细胞培养 植物组织培养 项目 过程 细胞膜的_______ 细胞膜的 _______、细胞的_______ 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 流动性 流动性 全能性 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能 克服了远缘杂交的_____ _____，获得杂种植株 意义 杂交细胞 杂种植株 结果 除物理法和化学法外还可以用___________诱导 物理法：离心、电激、振动； 化学法：聚乙二醇等试剂诱导 融合方法 __________或胶原蛋白酶 纤维素酶和______ 相关酶 动物细胞融合 植物体细胞杂交 果胶酶 胰蛋白酶 灭活的病毒 不亲 和性 THANKS! 谢谢观看