第六章酶的固定化材料.ppt

六 需注意的几个方面问题 （一）酶活性的测定方法 （二）制备过程中保持酶活性稳定的方法 （三）固定化酶的保存方法 （一）酶活性的测定方法 1 测定酶的固定化量 固定化反应完成后，以原始酶量减去洗涤液（反应液） 中残存的酶含量。 2 测定颗粒直径 固定化酶的粒径越小，酶活性越高。固定化酶颗粒直径 大小影响酶活性。 3 测定酶反应最适pH值 酶固定化后反应的最适pH较原来的酶有所变化。 4 检查酶是否脱落 测定酶活性后，滤除固定化酶，用离心所得的溶液再经 过适当保温检查是否还继续进行反应，如果溶液中出现酶 反应，说明酶脱落。 （二）制备过程中保持酶活性稳定的方法 1 包埋法、聚丙烯酰胺凝胶法或微型胶囊法时，固定化 反应时，预先用与酶有特异亲和力的底物等，保护酶 的活性中心，而后再进行固定化反应。 2 以酶的前体状态进行固定化，然后经过活化制备固定 化酶。 3 防止酶在催化反应中活性下降 下降原因 （1）酶的变性 （2）吸附了酶的抑制物质。 （3）被微生物污染 （4）酶脱落 （5）载体崩溃或变形分解 （6）操作失误 （三）固定化酶的保存方法 使用时固定化酶的保存是一个很重要的环节。 1 真空冷冻