ARMS技术介绍学案.ppt

ARMS技术的介绍（the amplification refractory mutation system） 一、ARMS技术的原理二、ARMS技术的特点三、MGB探针及原理四、MGB探针的特点五、ARMS技术的应用六、ARMS实例：β-地中海贫血位点 主要内容 一、ARMS技术的原理 基本原理：TaqDNA聚合酶缺少3’-5’外切酶活性。在一定条件下PCR引物3’末端的错配导致产物的急剧减少，针对不同的已知突变，设计适当的引物可以通过PCR方法直接达到区分突变型和野生型基因的目的。 突变阻滞扩增系统（ARMS-PCR(amplification refractory mutation system)），又名等位基因特异PCR(allele specific PCR，ASPCR)。 ARMS技术针对引物3’端进行等位基因特异性的区分。 两种引物形式：“normal”野生型引物，扩增时会被突变的模板阻滞；“mutant”突变型引物，扩增时会被野生型模板阻滞。 一般情况下，通过引物3’端单个碱基的突变来区分等位基因效果并不理想。所以ARMS技术在大多数情况下还会人为的增加引物3’端附近的碱基的突变以达到区分等位基因的效果。 N-6 N-4 N-2 N N-3 以kappa casein基因的一个突变位点为例 二、ARMS技术的特点 2.1 ARMS