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正交试验法优选胃安颗粒的提取工艺 　　摘要：目的 优选胃安颗粒最佳提取工艺。方法 以出膏率和黄芪甲苷含量为指标，以提取时间、加水量、提取次数为考察因素，应用正交试验法筛选最佳的水提工艺条件。结果 最佳提取工艺为：药材加10倍量水，提取2次，每次2 h。结论 该提取工艺合理，操作简便，可行性佳，能够为实际生产提供依据。 　　关键词：胃安颗粒；正交试验；提取工艺；出膏率；黄芪甲苷 　　中图分类号：R283.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2013）01-0056-02 　　胃安颗粒是本院专家的临床经验方，已作为院内制剂在本院生产使用。该处方由黄芪、厚朴、白花蛇舌草、蒲公英、海螵蛸等12味中药组成，其功能为理气和胃、消瘀止痛，主要适用于幽门螺杆菌阳性、慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎伴肠化生。为了使该制剂的提取工艺更加合理可靠，本试验以黄芪甲苷含量和出膏率为考察指标，采用正交试验设计，优选其最佳提取工艺。 　　1 仪器与试药 　　LC-10AT高效液相色谱仪（日本岛津），CP2250型电子分析天平（奥豪斯国际贸易有限公司），HH-S2数显电热恒温水浴锅（江苏正基仪器有限公司）。 　　试验所用药材均购于山东菏泽泰山中药饮片有限公司，符合2010年版《中华人民共和国药典》（一部）相关规定；黄芪甲苷对照品购于中国药品生物制品检定所（批号110781- 200613）；D101型大孔吸附树脂（LS公司）；其余试剂为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 正交试验设计 　　方中黄芪为君药，黄芪甲苷为主要有效成分[1-3]，且此方中其他药物主要含有水溶性有效成分，经查阅相关文献[4-5]，本试验对胃安颗粒采用水提取的制备方法。选取加水量（A）、提取次数（B）和提取时间（C）作为提取工艺的3个因素（见表1），进行正交试验。 　　2.2 出膏率的测定 　　取原处方药材1/5的量，共58 g，取9份，按照L9（34）正交试验的方法进行提取，滤过，浓缩。将浓缩液置于鼓风干燥箱中 　　烘干后，精密称定所得干膏质量，计算出膏率。出膏率=干膏质量/原药材质量×100%。 　　2.3 黄芪甲苷含量测定 　　2.3.1 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（32∶68）为流动相；蒸发光散射检测器检测。理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于4 000。 　　2.3.2 对照品溶液的制备 参照2010年版《中华人民共和国药典》方法[3]，取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，即得。 　　2.3.3 供试品溶液的制备 参照2010年版《中华人民共和国药典》方法[3]，将按照L9（34）正交试验提取的药液，各精密量取10 mL，用水饱和的正丁醇振摇萃取3次，每次30 mL，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次30 mL，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5 mL使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱（内径为1.5 cm，柱高为12 cm），以水50 mL洗脱，弃去水液，用40%乙醇30 mL洗脱，弃去洗脱液，再用70%乙醇80 mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 　　2.3.4 测定法 分别精密吸取对照品溶液10、20 ?L，供试品溶液20 ?L，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。 　　2.4 结果与分析 　　采用L9（34）正交试验，计算出膏率和黄芪甲苷含量，进行多指标综合评价分析。试验结果见表2，方差分析见表3。 　　由方差分析结果可以看出：以出膏率为考察指标时，因素A（加水量）、C（提取时间）的影响比较显著，且AC，因素B（提取次数）的影响不显著；通过极差大小分析，可以得出结论，影响水提取效果的顺序为ACB，且A3A2A1，B2B3B1，C3C2C1，因此最佳提取工艺为A3B2C3。以黄芪甲苷含量为考察指标时，因素A（加水量）、C（提取时间）的影响比较显著，且AC，因素B（提取次数）的影响不显著；通过极差大小分析，可以得出结论，影响水提取效果的顺序为ACB，且A3A2A1，B2B3B1，C3C2C1，因此最佳提取工艺也为A3B2C3。综合直观分析及生产实际，确定水提取最佳工艺为A3B2C3，即药材加10倍量水，提取2次，每次2 h。 　　2.5 验证试验 　　按处方比例称取黄芪等药材3份，按照优选工艺进行验证试验。结果见表4。表明优选工艺A3B2C3具有较好的重复性，此提取工艺合理可靠。 　　3 结论 　　该制剂是根据方中药物所含有效成分和主要成分的理化性质，参考各药物在传统制剂中的提取方法、传统用药习惯及现代药理研究结果设计的制备工艺。由于方中