维生素C和维生素E联合应用对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用.docVIP

维生素C和维生素E联合应用对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用 　　【摘要】目的：观察维生素c（Vitc）和维生素E（VitE）以及VitC和VitE联合应用对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用。方法：采用夹闭肾蒂1h进行并再通进行缺血再灌注损伤的造模，再灌注前10min在不同分组的大鼠进行舌下静脉注入Vit（200mg/kg）；VitE乳剂（100mg/kg）以及vit（200mg/kg）和VitC联合使用。再灌注2h后测定肾组织匀浆MDA含量及SOD活性，血肌酐，尿素等指标从而观察缺血再关注损伤程度及药物保护作用。结果：VitC给药组、VitE给药组以及VitC、E联合给药组的肾组织匀浆SOD活性明显高于模型组。其中以VitC、E联合给药组最为显著（p0.01）；MDA，血肌酐，血尿素值均低于模型组（p0.05），以VitC、E联合给药组改善最为显著（p0.01）。VitC、E联合给药组与VitE给药组和VitC给药组相比也有显著差异（p0.05）。结论：VitC和VitE对肾缺血再灌注损伤具有协同保护作用。 　　【关键词】维生素C；维生素E；缺血再灌注损伤 　　【中图分类号】R151.2 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8517（2013）10-0023-03 　　肾缺血再灌注损伤（Ischemia/Reperfusion Injury，/RI）是临床上常见的病理生理现象，肾脏的移植是产生肾脏缺血再灌注损伤的主要情形。其中自由基损伤和脂质过氧化是缺血再灌注损伤的主要机制。对于。肾脏缺血再灌注损伤的保护药物近年来也在不断的研究与开发之中，Nakaga-wa和Cicalese证实了利用超氧化物歧化酶（sOD）和还原性谷胱甘肽的抗自由基及脂质过氧化作用。但是由于SOD的来源受限以及价格比较昂贵，谷胱甘肽的作用发生需要阿尔法硫辛酸的存在下放能发挥作用。 　　因此我们可以考虑同样具有抗氧化作用且方便而且价格便宜对人体副作用比较小的维生素c和维生素E作为缺血再灌注损伤的保护药。 　　研究显示，再灌注前经脉注射VitC和（或）VitE乳剂可有效保护大鼠肺的缺血再灌注损伤，表现在组织损伤程度降低，肌酐尿素氮升高水平得到控制。但是VitC和VitE对肾脏缺血再灌注损伤的保护效果以及联合运用效果和与其它阳性药物效果的比较目前缺少报道。因此我们用大鼠复制了肾缺血再灌注模型，进行VitC和VitE乳剂以及联合用药对缺血再灌注保护作用的研究，通过检测血肌酐、尿素氮、SOD和MDA等指标对动物缺血再灌注损伤程度进行检测。 　　1、材料和方法 　　1.1 实验动物及分组 雄性SD大鼠120只（健康状况良好），体重232±10.8g，购自吉林大学实验动物中心。平均分为6组，每组20只。1组为假手术组（开腹不接扎肾蒂），给予生理盐水注射0.5ml；2-6组进行缺血再灌注造模处理（结扎肾动脉60min）：其中2组每只给谷胱甘肽2mg/kg，加生理盐水至0.5ml；3组每只给维生素c 200mg/kg，加生理盐水至0.5ml；4组每只给维生素E 100mg/kg，加生理盐水至0.5ml；5组为维生素c、E联合给药，每只给维生素c 200mg/kg、维生素E 100mg/kg，加生理盐水至0.5ml；6组为模型组，给予生理盐水每只0.5ml。 　　1.2 主要药品与试剂 VitC；购自长春亚泰药业集团（批号；VitE；购自长春亚泰药业集团（批号；还原性谷胱甘肽：购自重庆药友制药有限责任公司（批号；MDA试剂盒：购自长春生物制品所（批号；尿素氮试剂盒：购自长春生物制品所（批号；肌酐（cr）试剂盒：购自长春生物制品所（批号；超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒：购自长春生物制品所（批号。 　　1.3 复制缺血再灌注损伤模型 3%的戊巴比妥钠腹腔内注射麻醉，将大鼠仰卧固定于手术台上。腹腔注射20%乌拉坦0.5ml/100g，麻醉彻底后，大鼠按仰卧位固定，经腹腔入路。从大鼠腹侧正中剑突下方向下开一约5em的口，将肠管翻至体外，找到两侧肾脏后，用结扎线结扎肾蒂，结扎线系活结，结扎完毕后将肠管还纳，用止血钳将切口钳住。皮下注射少量生理盐水。结扎时间为60min，再灌注前10min进行舌下静脉给药。手术结束后，切口周围用青霉素消毒，之后进行缝合。给药2小时后，准备进行相关指标的检测。之后打开腹腔。分离暴露腹主动脉，用注射器直接穿刺动脉采血5ml用于血浆中MDA，肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）的检测。之后继续抽血，处死动物。同时分离左肾，取肾上极组织0.5g，用4.5ml生理盐水在4℃下用电动匀浆机以12000r/m