薄层色谱法预览.pptVIP

7.2 薄层色谱法的基本原理 1.保留参数（Rf值） 用来表征斑点位置的基本参数是保留因子，通常称作比移值，用Rf表示。 Rf=Ls/L。， 7.3 薄层色谱系统及其操作技术 一. 薄层色谱系统组成 1. 薄层板 (1)未改性固定相 硅胶—为使用最广泛的薄层材料 氧化铝—有碱性、中性、酸性 硅藻土—为化学中性吸附剂 纤维素—天然多糖类 聚酰胺—为特殊类型有机薄层材料，对能形成氢键的物质有特别的选择性。 7.3.4 流动相与展开体系 1.液-固吸附 ——在该色谱中，溶质的保留和分离选择性决定于三个因素： 7.4 薄层色谱法定性、定量方法 一.定性方法 利用保留值 测定Rf值 测定相对Rf值，即Rx值。 利用二维色谱（改变色谱条件，比较Rf值是否一致） 三. 薄层扫描 1.薄层定量方法: 直接法——测定光照射色谱后，因被测物斑点的存在引起的透射光和反射光的变化。并通过随行标准比较待测斑点的量。 间接法——将部分照射光的能量转换成较长波长的荧光，即荧光测量。 薄层色谱定量测定的光学方法是基于测量斑点和薄层空白处光学响应信号的差值。 7.5 薄层色谱法的应用 药物鉴别——采用标准对照法 杂质检查 杂质对照品法 高低浓度法 药物标准品对照法 不允许有杂质斑点存在，即以方法灵敏度来控制杂质量。 含量测定——主要用于中药有效成分的分析 此法更广泛应用于中草药与中成药主要有效成分定量分析，如应用各种改性硅胶G薄层色谱，马柏林等分离了杜仲叶中桃叶珊瑚甙，张尊听等分离了葛根、葛根注射液、玉泉丸中的葛根素;李多伟等分离了芦荟中的芦荟甙、银杏外种皮中的白果酸;陈代贤等分离了真伪土茯苓中的土茯苓，葛早川等分离了黄连、香连丸、加味左金丸中的小檗碱、巴马汀和药根碱，然后用双波长反射锯齿薄层扫描定量分析各有效成分。康纯等用聚酰胺薄层色谱板分离了槐花米、黄芩复方芦丁片、双黄连口服液中的黄酮类化合物，并直接进行薄层扫描定量分析。李素琴应用硅胶60色谱板分离了蟾酥中的哇巴因，将哇巴因斑点洗脱液进行反向高效液相色谱定量分析。 在生物样品分析领域，应用高效硅胶G薄层板分析了尿样中生物样品氯硝西泮代谢物7一氨基氯硝西泮；Uchikoba等应用硅胶GF 薄层板分析了血红素中类胰岛素酶；应用经0.27mol／L、pH=7的EDTA溶液修饰的硅胶G薄层扫描；定量分析了血样、尿样中的氟罗沙星和司帕沙星。在毒物分析方面,应用硅胶GF薄层板分析了咖啡因、安替比林、吗啡、安定等50种毒物。 4.食品分析 薄层色谱法还应用于分离测定食品中所含有的碳水化合物、维生素、有机酸、氨基酸等天然营养成分，也用于食品添加剂如色素、防腐剂等，以及某些真菌毒素如黄曲霉毒素的分析。应用硅胶GF 薄层高效色谱板分析了大豆磷脂酰胆碱(SPC)粗品中的大豆磷脂酰胆碱；刘宇红等应用硅胶GF 薄层高效色谱板，分析了食品甜味剂三氯半乳蔗糖(TGS)；应用硅胶G薄层色谱单波长反射锯齿扫描定量分析了蔗糖酯中的蔗糖单酯与蔗糖多酯；应用硅胶G薄层色谱双波长反射锯齿扫描及与HPLC联用，定量分析了猪油中的胆固醇；应用硅胶高效板，单波长反射法吸收扫描定量分析了调味品姜黄中的姜黄素。 学习利用岛津 CS-9301 型薄层色谱扫描仪测定甲基红含量的原理与方法，初步了解 CS-9301 型薄层色谱扫描仪的结构与使用。 用于定量的薄层色谱仪称为薄层色谱扫描仪或薄层色谱光密度计，用此种仪器对薄层上被分离的物质进行直接定量分析的方法称为薄层色谱扫描法。 分析的基本原理是用一束长宽可以调节的一定波长、一定强度的光照射到薄层斑点上，对整个斑点进行扫描，用仪器测量通过斑点或被斑点反射的光束强度的变化达到定量分析的目的。 本实验根据甲基红的极性，在硅胶板上用混合展开剂展开，然后采用岛津 CS-930 1型双波长薄层色谱扫描仪，可直接在薄层板上对甲基红斑点进行定量分析。 本章作业题 比移值,分配系数,分离度,理论塔板数,外标法和内标法的含义及求法分别是什么? 简述薄层色谱法分离样品的步骤. 在层析过程中发生的边缘效应就是由于这种因素引起的。尤其是使用混合溶剂时，极性较弱和沸点较低的溶剂，在薄层边缘容易挥发，使边缘部分的展开剂中极性溶剂的比例增大，Rf相对增大。同一物质在同一薄层板上出现中间部分的Rf值比边缘的Rf值小，即边缘效应，若在展开前先将展开槽与薄层板用展开剂蒸气饱和后再展开，边缘效应可消失。采用双槽层析缸尤为有利。 预吸附中 展开中 展开过程中用不同于展开剂的溶剂调节槽内气氛 s b1 b2 b2 s b1 s b1 b2 点样 第一次展开 第二次展开 通过板上光谱图定性 直接测定薄层板上斑点的紫外或可见吸收光谱图，与平行点加的标准斑点的图谱对照。 可建立标准条件下的化合物的光谱图库，用计算机检