10紫外—可见分光光度法C..pptVIP

分析化学Ⅱ 第十章 紫外-可见 分光光度法 　　　分析化学教研室 第五节 定性和定量分析 一、定性分析 二、定量分析 一、定性分析 （一）定性鉴别 定性鉴别的依据→吸收光谱的特征 吸收光谱的形状 吸收峰的数目 吸收峰的位置（波长） 吸收峰的强度 相应的吸光系数 续前 1．对比吸收光谱的特征值 续前 2．对比吸光度或吸光系数的比值 ——多吸收峰物质 例： 续前 2．对比吸收光谱的一致性 同一测定条件下， 与标准对照物谱图或标准谱图 进行对照比较 醋酸可的松 醋酸氢化可的松 相同的λmax和E 醋酸泼尼松 续前 （二）纯度检查和杂质限量测定 1．纯度检查（杂质检查） 续前 2．杂质限量的测定： 例：肾上腺素中微量杂质——肾上腺酮含量计算 2mg/mL -0.05mol/L的HCL溶液，λ 310nm下测定 规定 A310≤0.05 即符合要求的杂质限量≤0.06% 二、定量分析 （一）单组分的定量方法 1．吸光系数法 2．标准曲线法 3．对照法：外标一点法 续前 1．吸光系数法（绝对法） 练习 例：维生素B12 的水溶液在361nm处的百分吸光系数为207，用1cm比色池测得某维生素B12溶液的吸光度是0.414，求该溶液的浓度（见书P261例1） 解： 练习 （重点） 例：精密称取B12样品25.0mg，用水溶液配成100ml。精密吸取10.00ml，又置100ml容量瓶中，加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，于361nm处测定吸光度为0.507，求B12的百分含量？（见书P61例2－方法2） 解： 练习 例： 解： 续前 2．标准曲线法 示例 芦丁含量测定 续前 3．标准对照法：外标一点法（生产中多采用） 注：当样品溶液与标准品溶液的 稀释倍数相同时 练习 例： 维生素B12的含量测定 精密吸取B12注射液2.50mL，加水稀释至10.00mL；另配制对照液，精密称定对照品25.00mg，加水稀释至1000mL。在361nm处，用1cm吸收池，分别测定吸光度为0.508和0.518，求B12注射液注射液的浓度以及标示量的百分含量（该B12注射液的标示量为100μg / mL） 解： 续前 （二）多组分的定量方法（了解） 三种情况： 1．两组分吸收光谱不重叠（互不干扰） 两组分在各自λmax下不重叠→分别按单组分定量 续前 2．两组分吸收光谱部分重叠 λ1→测A1→b组分不干扰→可按单组分定量测Ca λ2→测A2→a组分干扰→不能按单组分定量测Ca 续前 3．两组分吸收光谱完全重叠——混合样品测定 （1）解线性方程组法 （2）等吸收双波长消去法 （3）系数倍率法 1．解线性方程组法 步骤： 2．等吸收双波长法 步骤： 消除a的影响测b 续前 消去b的影响测a 注：须满足两个基本条件 选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点 选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大 3．系数倍率法 前提：干扰组分b不成峰形 无等吸收点 （三）光电比色法 1、显色反应及其条件 金属离子与配体形成稳定有色络合物，灵敏度高，选择性好 显色反应：试剂、溶剂、酸碱度、时间、温度等， 通过实验优化 测定条件选择：吸收波长 2、测定方法 标准曲线法 练习 解： 练习 解： 练习： P276，习题1、2、3、5，6 * * * 定性鉴别 纯度检查和杂质限量测定 单组分的定量方法（重点） 多组分的定量方法 光电比色法 定量练习 返回 1）峰位不重叠： 找λ→使主成分无吸收，杂质有吸收→直接考察杂质含量 2）峰位重叠： 主成分强吸收，杂质无吸收 / 弱吸收→与纯品比较，E↓ 杂质强吸收 主成分吸收→与纯品比较，E↑，光谱变形 返回 方法2— 返回 缺点：配系列溶液 0.710mg/25mL 返回 返回 返回 返回 1．精密称取咖啡酸样品10.00mg，加少量乙醇溶解，转移至200mL量瓶中，加水定容。取此溶液5.00mL，置50mL量瓶中，加稀HCL 4mL，加水定容。取此溶液于1cm比色池中，在323nm处测定A=0.463，已知该波长处的 ，求咖啡酸百分含量 稀释因子 2．精密称取0.0500g样品，置250mL量瓶中，加入稀HCL溶解并定容。吸取2.00mL至100mL量瓶重，加入稀HCL稀释至刻度。以稀HCL为空白，在263nm处用1cm吸收池测定T=