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七氟醚抑制人红细胞抗氧化能力的实验研究 　　[摘要] 目的 观察七氟醚对人红细胞抗氧化能力的影响，探讨其作用机制。 方法 健康成年人红细胞制成2%悬液，分为8组：单纯空气组（A组）、1%七氟醚组（S1组）、3%七氟醚组（S3组）、5%七氟醚组（S5组）、空气+过氧化氢（H2O2）组（A+H组）、1%七氟醚+H2O2组[（SI+H）组）]、3%七氟醚+ H2O2组（S3+H组）、5%七氟醚+ H2O2组[（S5+H）组）]，各组通醚时间为30 min，孵育15 h后，加入反应浓度为200 μmol/L H2O2，继续孵育3 h后检测溶血率、过氧化氢酶（CAT）及丙二醛（MDA）含量，所得数据用SPSS 13.0软件统计处理。 结果 （S3+H）组溶血率（%）（17.384±1.976）比（A+H）组（10.848±0.274）和S3组（12.417±0.716）明显增加（P = 0.007，P = 0.027）。与A组（17.301±4.222）相比，S3组（5.431±0.531）和S5组（5.175±0.658）CAT含量（U/mgHB）明显降低（P = 0.009，P = 0.009）。（S1+H）组（4.319±0.235）、（S3+H）组（8.257±1.389）和（S5+H）组（9.156±0.742）CAT含量均较（A+H）组（13.689±2.003）明显降低（P 0.05）。而MDA含量（μmol/gHB）（S1+H）组（3.547±0.898）和（S3+H）组（4.474±0.653）均比（A+H）组（2.654±0.509）增高（P = 0.031，P = 0.021）。 结论 七氟醚可降低红细胞抗氧化能力，其机制与抑制过氧化氢酶活性有关。 　　[关键词] 七氟醚；过氧化氢；红细胞；溶血 　　[中图分类号] R96 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）09（c）-0025-04 　　七氟醚是目前临床常用的吸入麻醉剂，属卤代烃基醚，广泛地应用于临床全身麻醉手术。红细胞膜富含不饱和脂肪酸，这些不饱和脂肪酸对自由基诱导的过氧化非常敏感。内源性反应不断产生自由基，高水平的外源性或内源性自由基可能导致细胞结构的主要组成部分受到破坏，包括核酸、蛋白质类、氨基酸、脂类以及碳水化合物，并可能影响细胞的多种功能，如细胞膜功能、代谢甚至基因表达，并导致一系列其他病理状态[1-2]。抗氧化剂是机体对抗自由基及氧化因素的防御机制[3]。活性氧族（ROS）与防御、修复机制之间的平衡失调导致了氧化应激的产生[4]。 　　有文献报道[5]，应用七氟醚与异丙酚麻醉相比，患者术后24 h红细胞计数前者明显较低，七氟醚浓度为1.5最低肺泡有效浓度（MAC）时血红蛋白明显降低[6]，这是否与七氟醚降低红细胞抗氧化能力，导致的自由基对红细胞的损伤有关，目前报道较少。红细胞的氧化应激及抗氧化能力可通过多种指标进行检测，如脂质过氧化的终产物丙二醛（MDA）[7]。细胞及细胞膜脂质对氧化反应的敏感性可通过应用氧化剂诱导氧化反应，进而检测MDA的产生量[8-9]。故本实验以健康成人红细胞为研究对象，采用体外培养方式，以低浓度过氧化氢（H2O2）为损伤因素，通过对红细胞溶血率、过氧化氢酶（CAT）及MDA含量的检测来观察七氟醚对红细胞抗氧化能力的影响并探讨其作用机制。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 药品及试剂 新鲜血液（B型，符合《中华人民共和国献血法》健康检查标准的2011年12月21日献血者捐献的血液标本），液态七氟醚（江苏恒瑞公司），30% H2O2（批号110618，北京海德润制药有限公司），林格氏液（批号1，陕西省康乐制药厂），5%葡萄糖液（批号1，陕西省康乐制药厂），蒸馏水，CAT含量试剂盒（南京建成公司），MDA含量试剂盒（南京建成公司）。 　　1.1.2 试验用仪器及设备 麻醉机（欧美达Avance，美国欧美达公司），七氟醚挥发罐、麻醉气体采样管（随麻醉机附带），酶标分析仪（RT-6000，深圳雷杜公司），160C型医用低速离心机（白洋公司），THZ-95型台式恒温震荡培养箱（北京四环科学仪器厂），带胶塞10 mL灭菌瓶，三通开关，1000 μL微量加样器，50 mL离心管，5 mL离心管，96孔板，封口胶。 　　1.2 方法 　　1.2.1 含糖林格氏液配置 按体积比52∶1在林格氏液中加入5%葡萄糖液。使溶液含氯化钠145 mmol/L、氯化钾4 mmol/L、氯化钙2 mmol/L、葡萄糖5 mmol/L，pH=7.4。 　　1.2.2 配制红细胞悬液及实验分组 用抗凝采血管采集成年非吸烟健康志愿者外周静脉全血