荧光分析法讲述.pptVIP

荧光测量中所用的光源一般比紫外-可见分光光度计所使用的光源发光强度大，激发光源通常采用发射强度高的汞弧灯、氢灯或氙弧灯。氙弧灯产生强烈的连续辐射，其波长范围在220~700nm之间。 1.激发光源 在荧光光度计中使用滤光片充当单色器。大多数荧光分光光度计都采用光栅或棱镜单色器。一般有两个单色器，一是激发光单色器，其作用获得单色性较好的激发光，以激发样品产生荧光；另一是发射光单色器，其作用在于分出某一波长的荧光，以减少干扰。 2.单色器 荧光分析所用样品池需用低荧光、不吸收紫外线的石英材料制成，形状以正方形、长方形为宜，也有用圆形的 3.样品池 4.检测器 荧光的强度很弱，因此要求检测器有较高的灵敏度。荧光分光光度计一般采用灵敏度高的光电管或光电倍增管做光电转换元件，为了消除激发光对荧光测量的干扰，在仪器中，检测光路与激发光路相互垂直。 荧光分析法可用于对荧光物质进行定性和定量分析。荧光定性分析可采用直接比较法，即将试样与已知物质并列于紫外线下，根据他们所发出荧光的性质、颜色和强度，来鉴定他们是否含有同一荧光物质。但由于许多化合物几乎在同一波长下产生光致发光，所以荧光分析法很少用作定性分析。 目前荧光分析法主要用于对无机和有机化合物的定量分析。 荧光分析法应用 步骤： 1.配制不同浓度的标准 溶液 2.做F～C关系曲线 3.求得浓度 定量分析方法 1.校正曲线法 C F 校正曲