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RNA相关知识及提取原理 RNA提取流程 实验举例及实验中注意点 特殊组织RNA的提取 RNA的评价与鉴定 RNA的保护 RNA相关知识及提取原理--RNA的裂解原理 盐酸胍裂解样本,抑制RNase的活性 β-巯基乙醇变性蛋白 RNA相关知识及提取原理--RNA吸附原理 RNA相关知识及提取方法原理 RNA提取流程 实验举例及实验中注意点 特殊组织RNA的提取 RNA的评价与鉴定 RNA的保护 RNA提取流程 1、样本前处理 2、细胞裂解 3、 RNA的纯化及获得 RNA提取流程-- 样品前处理注意点 RNA提取流程样本前处理的目的:离散,均一,细胞集或细胞液 样品的前处理方式 RNA提取流程 1、样本前处理 2、细胞裂解 3、 RNA的纯化及获得 RNA提取流程--细胞裂解,以释放RNA 异硫氰酸胍/酚-TRNzol总RNA提取试剂 RNA提取流程 1、样本前处理 2、细胞裂解 3、 RNA的纯化及获得 RNA提取流程-- RNA的纯化及获得 RNA相关知识及提取原理 RNA提取流程 实验举例及实验中注意点 特殊组织RNA的提取 RNA的评价与鉴定 RNA的保护 实验举例 使用试剂(以TRNzol- A+为例) 使用试剂盒(以RNAprep pure试剂盒为例) 试验材料: Hela cell/106 实验方法: TIANGEN公司 TRNzol-A+ A公司同类产品 试验结果: 得率:TRNzol-A+得率与A公司同 类产品略高 纯度: 经TRNzol-A+纯度较高, 无明显DNA、蛋白残留 实验注意事项--应用TRNzol-A+的注意点 前处理 试验材料:大鼠肝脏/10mg 实验方法: TIANGEN公司 RNAprep pure Kit A公司某柱式RNA提取试剂盒 试验结果: 得率:RNAprep pure 得率比A公司产品高15%左右 高纯度:纯度较高,且无盐份残留 实验注意事项--应用RNAprep pure的注意点 RNA相关知识及提取方法原理 RNA提取流程 实验举例及实验中注意点 特殊组织RNA的提取 RNA的评价与鉴定 RNA的保护 一些特殊组织的RNA提取 纤维组织 蛋白/脂肪含量高组织 核酸/RNase含量高组织 植物组织/真菌组织 RNA相关知识及提取方法原理 RNA提取流程 实验举例及实验中注意点 特殊组织RNA的提取 RNA的评价与鉴定 RNA的保护 RNA的评价与鉴定 RNA相关知识及提取方法原理 RNA提取流程 实验举例及实验中注意点 特殊组织RNA的提取 RNA的评价与鉴定 RNA的保护 RNA的保护--RNA的不稳定性 RNA的保护--提取过程中的RNA保护 组织破碎 细胞裂解 实验人员 RNA的保护--保存过程中及后续实验中的RNA保护 保存过程 RNAsafe 后续实验 RNasin TIANGEN公司新产品--RNAstore Reagent 原 理: 一种液态的、无毒的组织保存试剂,通过迅速渗入组织细胞中,抑制RNase活性,从而保护样本中的RNA不发生降解,维持RNA的完整性。 适用范围: 动物组织样本 细菌 组织培养细胞 全血中的白细胞 天根产品RNAstore Reagent—优势分析 延长保存时间 常温1周、37℃ 1天、 4℃至少保存1个月;组织4℃浸泡过夜后-20℃或-80℃可长期保存 方便操作 样本取出后,可方便进行切割、称重等操作 可反复冻融 冻存于-20℃或-80℃的组织可反复冻融至少20次不影响RNA质量 不影响下游应用 从RNAstore取出样本后,可直接使用TRNzol、 RNAprep pure、RNAsimple等RNA提取试剂盒提取 天根产品RNAstore Reagent—实验结果 裂解 结合 漂洗 洗脱 控制提取样品量 防止堵柱或漏柱 盐离子去除 得率控制 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. RNA回收率 实验注意事项--洗脱体积与得率关系 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client P
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