动物细胞工程精选.pptVIP

阅读思考： 为什么细胞培养要分散成单个细胞培养？怎样分散？ 1.成块的组织中细胞与细胞靠在一起，彼此限制了细胞的生长和增值。 2.从健康动物体内取出组织块，剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 动物细胞生长特性： 细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 要求： 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 讨论： 多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的内环境知识，思考并讨论以下问题： 1.体外培养细胞时需要提供哪些物资？ 2.体外培养的细胞需要什么样的环境件？ (2).动物细胞培养条件： 1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。） 3、温度和PH 36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4 4、气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） (3).动物细胞培养应用 大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体） 获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性 为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据 根据动物细胞核仍具有全能性的特点,怎样将动物细胞的全能性表达? 二.动物体细胞核移植技术: 1.概念： 将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新 的胚胎， 这个新的胚胎最终发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物 应用前景 1、加快家畜遗传改良进程 2、保护频危物种 3、器官移植供体 4、利用生物反应器生产生物蛋白 应 用 前 景 1、加快家畜遗传改良进程 2、保护频危物种 3、器官移植供体 4、利用生物反应器生产生物蛋白 存在问题 成功率低 存在健康问题 克隆动物食品的安全问题 1、定义：指用自然或人工方法使两个或多个不同的动物细胞融合成一个细胞的过程。 3、动物细胞融合技术的应用 细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。 利用细胞融合技术，制备单克隆抗体。 人们获得抗体的传统方运用法是? 将抗原注入动物体,然后从动物血清中提取抗体 这种方法的缺点是什么? 产量有限，纯度低，特异性差，反应不够灵敏 运用已学知识，设想怎样获得化学性质单一、特异性强的抗体？ 每一个B淋巴细胞只分泌一种化学性质单一，特异性强的抗体 如果利用单个B淋巴细胞进行无性繁殖（克隆），形成细胞群，这样的细胞群就有可能产生出化学性质单一、特异性强的抗体——单克隆抗体。 能否用单个B淋巴细胞通过克隆形成的细胞群来产生单一类型的抗体呢？ B淋巴细胞在体外不能无限增殖。 单克隆抗体的制备--- 极富创造性的方案 如果把一种B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞进行融合，所得到的融合细胞既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体 1、作为诊断试剂：在临床生化诊断、病理组织定位、体内肿瘤的定位等,与常规抗体相比,具有准确、高效、简易、快速特点. 2、用于治疗疾病和运载药物： 主要用于癌症治疗。 生物导弹：抗癌细胞的单克隆抗体+放射性同位素+化学药物或细胞毒素。（单克隆抗体：导向。准确找到癌细胞位置，原位杀死癌细胞。） 一、动物细胞融合 2.结果：形成了单核的杂交细胞 3.原理：细胞膜的流性 4、诱导方式： 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（PEG) 生物法：灭活的病毒 细胞融合是正常的生命活动 两个细胞正在融合 受精作用 把两个不同的动物细胞放在一起，用灭活的病毒处理细胞，它们先发生质融合，再出现核融合，进而形成杂交细胞。 融合后的杂交细胞经过有丝分裂后仍能形成两个完整的杂交细胞 动物细胞融合的过程 思考讨论：为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活？不灭活行吗？ 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂 质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，不灭 活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。 二：动物细胞融合的成功应用 ——单克隆抗体的制备 思考 怎样解决这一问题呢？什么样的细胞能够在体外无限增殖呢？ 米尔斯坦(阿根廷)和科勒(德国)因此在1984年获诺贝尔奖。 B淋巴细胞 注射特定抗原蛋白 骨髓瘤细胞 培养骨髓瘤细胞 融合 培养液中细胞有几种类型？ （只考虑两两融合）融合细胞几种类型？ 5种 B淋巴细