淋巴管生成因子、骨桥蛋白在大肠癌侵袭转移中的作用.docVIP

淋巴管生成因子、骨桥蛋白在大肠癌侵袭转移中的作用 　　[摘要] 目的 探讨淋巴管生成因子、骨桥蛋白在大肠癌组织中的表达及意义。 方法 应用免疫组织化学SP法检测51例大肠癌、15例大肠增生性息肉、15例正常大肠黏膜组织的淋巴管生成因子-C（VEGF-C）、骨桥蛋白（OPN）的表达。 结果 VEGF-C、OPN 在正常大肠黏膜组织中没有表达。大肠癌组织中VEGF-C的阳性表达率明显高于大肠腺瘤组织（P0.05），但与肿瘤生物学行为、淋巴结转移有关（P0.05）。 结论 VEGF-C和OPN在促进大肠癌浸润和肿瘤转移中起重要作用。 　　[关键词] 大肠癌；淋巴管生成因子；骨桥蛋白；免疫组织化学 　　[中图分类号] R735.3+4 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）07（c）-0047-02 　　近年来大肠癌发病率及病死率有逐渐增高的趋势，发病率以平均每年4.2%的速度递增[1]，局部复发及远程转移仍然是影响治疗效果的重要因素。研究大肠癌复发及转移机制，并有针对性地早期干预，对提高大肠癌患者的治疗效果及预后有积极意义。本研究联合检测大肠癌组织中淋巴管生成因子-C（VEGF-C）、骨桥蛋白（osteopontin，OPN）的表达情况，探讨其与大肠癌侵袭及淋巴结转移、远处转移等生物学行为之间的关系，阐释可能的机制，并探讨VEGF-C、OPN之间的关系，为有效治控制大肠癌的侵袭、转移，为下一步有针对性的靶向治疗提供理论依据。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　收集本院病理科2006～2011年手术切除的大肠癌标本55例，男31例，女24例；年龄30～79岁，平均58岁。术前经过化疗的病例未入组。肿瘤大小：≥5 cm 17例，5 cm 38例；分化程度：高、中分化腺癌23 例，低、未分化腺癌32例；临床证实有淋巴结转移42例，无淋巴结转移13例。根据Dukes分期法：A期8例，B期16例，C期25例，D期6例。另外取大肠腺瘤标本15例（腺瘤内镜下切除病理确诊）及正常大肠黏膜组织标本15例。标本用4%多聚甲醛固定，常规石蜡包埋，4 μm厚连续切片。 　　1.2 实验方法 　　使用链霉卵白素-生物素-辣根过氧化物酶复合物法（SP法）进行免疫组织化学染色。所需试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司。用已知阳性切片作阳性对照，阴性对照由PBS缓冲液代替一抗。具体步骤为：石蜡切片常规脱蜡至水→3%H2O2甲醇阻断20 min→双蒸水洗5 min×3次→0.1%胰酶消化37℃，10 min；双蒸水洗5 min×3次，枸橼酸盐缓冲液高火档微波处理，抗原修复5 min×2次，双蒸水洗5 min×3次→PBS洗5 min×1次，滴加封闭血清，37℃，30 min滴加一抗，37℃，30 min 4℃孵育过液→PBS洗5 min×3次，滴加二抗，37℃，30 min→PBS洗5 min×3次→滴加Streptadvitin-Peroxidase，37℃，30 min→PBS洗5 min×3次，DAB显色3～5 min，自来水冲洗→苏木素复染，脱水，封片→光镜观察。 　　1.3 结果判断 　　VEGF-C和OPN染色阳性为胞浆出现棕黄色颗粒。高倍镜下随机选取5个视野计数，每个视野计数200个细胞，VEGF-C阳性标准：阳性细胞率≥10%；小于10%为阴性。OPN阳性标准：阳性细胞率≥5%；小于5%为阴性。 　　1.4 统计学处理 　　应用SPSS 13.0统计学软件进行数据分析，采用χ2检验、Spearman等级相关分析，检验水准α=0.05。 　　2 结果 　　2.1 VEGF-C、OPN在大肠癌、大肠腺瘤、正常大肠黏膜组织中的表达 　　VEGF-C、OPN在正常大肠黏膜组织中没有表达。VEGF-C及OPN表达阳性为大肠癌组织细胞浆内的粽黄色颗粒，VEGF-C在大肠癌组织中的阳性表达率明显高于大肠腺瘤组织（P0.05）（表1）。 　　表1 VEGF-C、OPN在大肠癌、大肠腺瘤、正常大肠黏膜组织中的表达[n（%）] 　　与大肠腺瘤、正常肠黏膜组比较，*P0.05；与正常肠黏膜组比较，#P0.01 　　2.2 VEGF-C、OPN的表达与大肠癌临床病理特征之间的关系 　　VEGF-C及OPN在大肠癌组织中的表达与患者性别、肿瘤大小、肿瘤部位无相关性（P0.05），但与肿瘤 Dukes分期、分化程度、淋巴结转移有关性（P0.05）（表2）。 　　表2 VEGF-C、OPN的表达与大肠癌临床病理特征之间的关系 　　2.3 大肠癌组织中VEGF-C、OPN表达的相关性 　　55例大肠癌组织中VEGF-C阳性38例（69.1%），OPN阳性36例（65.5%），VEGF-C与O