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?pSC101与RSF1010的共整合: pSC109的构建 ◆象pSC101一样，质粒RSF1010上也只有一个EcoRⅠ切点，所以只要用EcoRⅠ分别处理质粒RSF1010和pSC101，然后用DNA连接酶将两个线性DNA连接起来转化大肠杆菌，得到一个具有三种抗性的重组质粒∶四环素抗性、链霉素抗性、磺胺抗性。 ◆这种重组说明两个复制子能够重组，并能在细胞内表达。 * ?可用分/合成、切、连（接）、转、选、鉴六个字表示。 * * * * 基因工程的应用 * * 基因工程是20世纪70年代发展起来的遗传学的一个分支学科 * Pest pest * Livestock livestock * 细胞染色体外能自主复制的小型环状DNA分子； 质粒是基因工程中最常用的运载体； 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒； 存在于许多细菌及酵母菌等生物中； 质粒的存在对宿主细胞无影响； 质粒的复制只能在宿主细胞内完成。 * * 提取目的基因 目的基因与运载体结合 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测和表达一 目的基因的检测和表达二 将需要的基因从供体生物的细胞内提取出来。 * 取 出DNA 用限制酶切断DNA 目前被较广泛提取使用的目的基因有：苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等。 直接分离基因——鸟枪法 * 将供体生物的DNA用限制酶切