(1)DNA荧光探针的制备过程如图1所示,DNA酶Ⅰ随机切开了核苷酸之间的__________键从而产生切口,随后在DNA聚合酶Ⅰ作用下,以荧光标记的__________为原料,合成荧光标记的DNA探针。 (2)图2表示探针与待测基因结合的原理。先将探针与染色体共同煮沸,使DNA双链中__________键断裂,形成单链。随后在降温复性过程中,探针的碱基按照__________原则,与染色体上的特定基因序列形成较稳定的杂交分子。图中两条姐妹染色单体中最多可有__________条荧光标记的DNA片段。 (3)A、B、C分别代表不同来源的一个染色体组,已知AA和BB中各有一对同源染色体可被荧光探针标记。若植物甲(AABB)与植物乙(AACC)杂交,则其F1有丝分裂中期的细胞中可观察到_______个荧光点;在减数第一次分裂形成的两个子细胞中分别可观察到_________个荧光点。 【解析】本题考查基因工程中工具酶的作用机理、DNA 分子杂交和减数分裂的相关知识。(1)由图1可知,DNA 酶Ⅰ使DNA链断裂,即作用于相邻脱氧核苷酸之间的磷 酸二酯键;DNA合成原料为脱氧核苷酸。(2)通过热变 性,使DNA碱基对之间的氢键断裂,复性时能重新形成 氢键,并且遵循碱基互补配对原则,形成杂交DNA分 子。两条姐妹染色单体,含有4条模板链,最多可与4 个被标记的DNA链结合形成4个荧光标记杂交DNA分子。 (3)根据减数分裂,植物甲(AABB)形成的配子染色体组 成为(AB),与植物乙(AACC)的配子(AC)受精后,合子 染色体组成为(AABC),又由于AA和BB中各有一对同源 染色体可被荧光探针标记,则AABC将会有3条染色体被 标记,6条染色单体可以观察到6个荧光点。AABC减数 分裂时,AA两个染色体组可以正常联会,并且同源染 色体分离,减数第一次分裂形成的两个子细胞分别获 得一个A染色体组,而B染色体组内的染色体随机进入两个子细胞,因此其中一个子细胞含有A和B染色体组内2条能被标记的染色体,标记4个染色单体、可以看到4个荧光点,另一个子细胞只含有A中1条能被标记的染色体,2个染色单体可以观察到2个荧光点。 答案:(1)磷酸二酯 脱氧核苷酸 (2)氢 碱基互补配对 4 (3)6 2和4 2.(2015·荆州模拟)口蹄疫是由RNA病毒引起的一种偶蹄目动物传染病。科学家尝试利用转基因番茄生产口蹄疫疫苗(其主要成分是该病毒的一种结构蛋白VP1),过程如下图所示。请据图回答下列问题: ____处理细胞 →_______细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子 将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物 将目的基因 插入______ 的T-DNA上→ 转入农杆菌 →导入植物 细胞→整合 到受体细胞 的_________ 上→表达 转化过程 微生物 动 物 植 物 生物种类 Ti质粒 染色体DNA Ca2+ 感受态 4.目的基因的检测与鉴定: 杂交带 ___________ _____ 目的基因是否 翻译成______ _____ 检测 杂交带 _________(DNA和mRNA之间) 目的基因是否 转录出_____ _____ 检测 杂交带 ____________ (DNA和DNA之间) 目的基因是否 进入________ 导入 检测 分子 检测 结果 显示 方法 检测内容 类型 受体细胞 DNA分子杂交 转录 mRNA 分子杂交 翻译 蛋白质 抗原—抗体 杂交 包括做抗虫、抗病的接种实验,以确定是否有抗性以及抗性的程度;对基因工程产品与天然产品的功能进行活性比较,以确定功能活性是否相同等 个体 水平 检测 结果显示 方法 检测内容 类型 【特别提醒】 基因工程操作的四个易错点 (1)目的基因的插入位点不是随意的,基因表达需要启动子与终止子的调控,所以目的基因应插入到启动子与终止子之间的部位。 (2)启动子(DNA片段)≠起始密码子(RNA);终止子(DNA片段)≠终止密码子(RNA)。 (3)基因表达载体的构建是最核心、最关键的一步,在体外进行。 (4)只有第三步(将目的基因导入受体细胞)没有碱基互补配对现象,其余三步都有碱基互补配对现象。 【高考模拟精练】 1.(2014·全国卷Ⅱ)植物甲具有极强的耐旱性,其耐旱性与某个基因有关,若从该植物中获得该耐旱基因,并将其转移到耐旱性低的植物乙中,有可能提高后者的耐旱性。回答下列问题: (1)理论上,基因组文库含有生物的________基因;而cDNA文库含有生物的________基因。 (2)若要从植物甲中获得耐旱基因,可首先建立该植物的基因组文库,再从中________出所需的耐旱基因。 (3)将耐旱基因导入农杆菌
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