第一章 第三节 酶活力及酶.pptVIP

米氏常数Km的意义 不同的酶具有不同Km值，它是酶的一个重要的特征物理常数。 Km值只是在固定的底物，一定的温度和pH条件下，一定的缓冲体系中测定的，不同条件下具有不同的Km值。 Km值表示酶与底物之间的亲和程度：Km值大表示亲和程度小，酶的催化活性低; Km值小表示亲和程度大,酶的催化活性高。 米氏常数的测定 基本原则：将米氏方程变化成相当于y=ax+b的直线方程，再用作图法求出Km。 1 Km 1 1 ??? = ?? ? ??? + ?? V Vmax [S] Vmax A. 取米氏方程式的倒数形式： 1/Vmax 斜率=Km/Vmax -1/Km 米氏常数Km的测定： B、E-H法 两边分别乘以Km+[S]／[S]，得 v=-Kmv/［S］+Vmax 酶的Km在实际应用中的意义 鉴定酶：通过测定Km，可鉴别不同来源或相同来源但在不同发育阶段，不同生理状态下催化相同反应的酶是否是属于同一种酶。 判断酶的最适底物（天然底物） 。 计算一定速度下底物浓度。 了解酶的底物在体内具有的浓度水平。 判断反应方向或趋势。 判断抑制类型。 可逆抑制(reversible inhibition) 及其动力学 E+I EI 可