第二章气相色谱法2012.9.10.pptVIP

色谱分离基本方程 分离度受柱效（n）、选择因子（α）和容量因子（k）三个参数的控制。 对于难分离物质对，由于它们的分配系数差别小，可合理地假设 k1 ≈k2 = k，Y1≈Y2 = Y。 由 n = 16 （ tR / Y） 2 得： 1 / Y =（ ? n / 4 ）? （1 / tR ） 将（2-15）tR=tM(1+k)代入 分离度R为： R =（ ? n / 4 ）?（ α - 1 / α ）（k / 1+ k） 上式即为色谱分离基本方程。 色谱分离基本方程 在实际应用中，往往用neff（即n有效）代替n处理上式, 可得 可以看出，后者为基本色谱分离方程式又一表达式。 1.分离度与柱效的关系 由分离方程式看出，具有一定相对保留值α的物质对，分离度直接和有效塔板数n有关，说明有效塔板数能正确地代表柱效能。当固定相确定，被分离物质对的α确定后，分离度将取决于n。这时，对于一定理论板高的柱子，分离度的平方与柱长成正比，即 说明用柱长的色谱柱可以提高分离度，但延长了分析时间。因此，提高分离度的好方法是制备出一根性能优良的柱子，通过降低板高，以提高分离度。 2.分离度与容量因子的关系 如果设： Q =（ ? n / 4 ）?（ α - 1 / α ） 那么： R = Q ?（k / 1+ k） 说明k大些较好，但并非越大越好（表2-2） 可通过改变柱温和相比改变k。 3. 分离度与选择因子的关系 由基本色谱方程式判断，当 α= 1时，R = 0。这时，无论怎样提高柱效也无法使两组分分离。显然，α大，选择性好。研究证明α的微小变化，就能引起分离度的显著变化。一般通过改变固定相和流动相的性质和组成或降低柱温，可有效增大α值。 详见表2-3的分析： α= 1，无法分离 α≤ 1.1， n（有效）很大，需柱很长 α≥ 1.25， n（有效）小可以，不需太长柱 ［例］有一根 lm长的柱子，分离组分1和2得到如下的色谱图。图中横坐标为记录笔走纸距离。（1）求有效塔板数（2）若欲得到 R=1.2的分离度，有效塔板数应为多少？色谱柱要加到多长？ 解：先求出组分2对组分1的相对保留值r2，1（即α值） （1）求有效塔板数neff neff＝16×（0.8）2[1.1/(1.1-1)]2＝1239 （2）若使R=1.2, 所需塔板数 因此,欲使分离度达到1.2,需有效塔板数为2788块,则所需柱长为 L=2788/1239 =2.25m [例] 已知某色谱柱的理论塔板数为3600,组分A和B在该柱上的保留时间为27mm和30mm,求两峰的峰半宽和分离度. 解: ∵ Y1/2=Y/1.7 Y1=27/(3600/16)1/2=1.8 mm (Y1)1/2＝1.8/1.7＝1.06 mm Y2=30/(3600/16)1/2=2.0 mm (Y2)1/2＝2.0/1.7＝1.18 mm R＝2(30-27)/(1.8+2)＝6/3.8＝1.6 [例] 已知物质A和B在一个30.0cm柱上的保留时间分别为16.40和17.63min.不被保留组分通过该柱的时间为1.30min.峰宽为1.11和1.21mm,计算: (1)??柱分辨本领;(2)?? 柱的平均塔板数目;(3)?? 塔板高度;(4)?? 达到1.5分离度所需的柱长度;(5) 在较长柱上把物质B洗脱所需要的时间.