单克隆抗体的制备_演示文稿.ppt

动物细胞融合  二、单克隆抗体 单克隆抗体及特点： 单克隆抗体制备过程 * 目标： 1、举例说出动物细胞融合的原理和应用 2、单克隆抗体的制备和应用 细胞A 细胞B 杂种细胞 灭活的病毒 物理法 化学法 仙台病毒 一、动物细胞融合 2、过程： 1、概念： 用 诱导动物细胞融合过程 细胞核 病毒颗粒 细胞核 思考讨论： 1、灭活的病毒诱导细胞融合的原理是： 2、为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活？ 灭活的病毒 用 途 诱导方法 融合前处理方法 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 比较项目 植物、动物细胞融合的比较 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 用 途 物理、化学方法 （同左） 灭活的病毒 物理法（离心、振 荡、电刺激） 化学法（聚乙二醇） 诱导方法 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 融合前的处理方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 比较项目 植物、动物细胞融合的比较 单克隆抗体 1、什么是抗体？其本质是什么？ 　 2、传统的抗体生产方法及缺陷是什么？ 抗体是从何来的？ B淋巴细胞产生抗体。 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 3、B淋巴细胞有什么特点？ 　　（１）．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体。 　　（２）．动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 　　（３）．每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。 3、B淋巴细胞有什么特点？ 单克隆抗体及特点： 　 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 特异性强、灵敏度高 遗憾的是… … 单克隆抗体制备过程？ 1、单克隆抗体： 2、特点： 单克隆抗体制备过程 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 视频\单克隆抗体的制备.flv 思考： 1、本过程利用了哪些技术？ 细胞融合技术和动物细胞培养技术 2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体 3、整个制备过程为何要经过两次筛选? 第一次筛选得到杂交瘤细胞（多种）， 第二次需先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。 由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的，所以产生的抗体必然是化学性质单一的，特异性强的单克隆抗体。 这里的单克隆的确有单个细胞克隆的含义，只不过克隆的不是B淋巴细胞，而是杂交瘤细胞。 B BB B瘤 瘤瘤 瘤 4、细胞融合后培养液中有几种细胞 单克隆抗体的应用 小结 动物细胞融合的原理和诱导方法 单克隆抗体制备过程 三个“一” 一个诱导细胞融合的新方法－－ 一个新细胞－－ 一个优势－－ 灭活的病毒 杂交瘤细胞 单克隆抗体 ：特异性强、灵敏度高的优势 1.动物细胞工程技术的基础是：（　　　　） 　A．动物细胞融合 　B．胚胎移植 　C．动物细胞培养 　D．核移植 教学目标巩固 Ｃ ２．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的 比较中，正确的是　　　　　　（　　） A．结果是相同的 B．杂种细胞的形成过程基本相同 C．操作过程中酶的作用相同 D．诱导融合的手段相同 教学目标巩固 Ｂ *