微生物发酵复习（gd）.docVIP

发酵工程组成从广义上讲，由三部分组成：上游工程、发酵工程、下游工程 发酵工程利用微生物的特点 初级代谢产物 次级代谢产物 生长繁殖是否必需 是 否 产生阶段 一直产生 生长到一定阶段 与微生物生长的关系 呈平行关系 不呈平行关系 对环境变化的敏感性 强 弱 种的特异性 非特异 特异性 分布 细胞内 细胞内外 次级代谢的调节：酶合成的诱导调节、反馈调节、碳、氮分解调节、磷酸盐调节、细胞膜透性调节 微生物代谢的人工控制 工业发酵的目的就是大量地积累人们所需要的微生物代谢产物。在正常生理条件下, 微生物总是通过其代谢调节系统最经济地吸收利用营养物质用于合成细胞结构，进行生长和繁殖，它们通常不浪费原料和能量，也不积累中间代谢产物。人为地打破微生物的代谢控制体系，就有可能使代谢朝着人们希望的方向进行，这就是所谓代谢的人工控制。虽然微生物代谢调节的理论目前还有很大的局限性，但它已在微生物育种和发酵工艺的优化中发挥了重要的作用。随着代谢调节理论的不断充实和完善，代谢的人工控制将对发酵工业发挥更加重要的作用。目前，人工控制代谢主要是通过遗传学和生物化学方法来实现的。 遗传学的方法 通过改变微生物遗传物质可以从根本上打破微生物原有的代谢控制机制，具体包括应用特定的营养缺陷型突变株、渗漏突变菌株、抗反馈调节的突变株、抗分解代谢突变株以及组成型突变菌株。 ?生物化学方法 ?添加前体绕过反馈控制点 ???? 不通过遗传学方法也能改变菌株的调节机制，采取添加前体绕过反馈调节点是一种有效的方法，能使某种代谢产物大量积累。如图，在发酵培养基中添加C，可以大量积累D。其原因是D的前体C来自外源，并不会因为D的积累而有很大的波动。由于F对从C到E 的反应有反馈调节，所以，只有少部分的C 用于合成F，大部分外源的C用于合成D。 **营养缺陷型突变株的应用 ?在一定的培养条件下，营养缺陷型突变株可以积累相当高浓度的中间代谢产物或末端代谢物。对于直线式代谢途径，选育末端代谢产物营养缺陷型的突变株只能积累中间代谢产物。如末端产物E对途径第一个酶有反馈阻遏或反馈抑制，而菌株失去了将C转化成D的力，是E的营养缺陷型。假如在培养基中限量添E，菌体得以生长，中间产物C能够大量积累。枯草芽孢杆菌的精氨酸缺陷型就是一个典型例子, 鸟氨酸积累量可达到25克/升。 对于分支代谢途径而言，情况比较复杂。如图所示，分支途径因E和G对途径第一个酶有协同反馈控制，而突变株失去了将C转变成D的能力，产物E无法正常生成, 从而解除了E和G的协同反馈控制。若培养基中限量补充E，由于末端产物G对C到F反应的控制，就会造成中间产物C的积累；  目前可测量的参数： 常测定参数：温度、罐压、空气流量、搅拌转速、 pH、溶氧、效价、糖含量、前体浓度、菌体浓度。 不常测定参数：氧化还原电位、粘度、排气中的O2和CO2含量等。 发酵工业对传感器的要求： 能经受高压蒸汽灭菌；具有长期稳定性；能在过程中随时矫正；探头材料不宜老化；探头安装使用和维修方便;解决探头敏感部位被物料（反应液）粘住，堵塞问题。 发酵过程的代谢变化规律： 发酵过程的特点： 多相：气相、液相和固相。 多组分：培养基中多种营养成分，多种代谢产物，细胞内也具有不同生理功能的大、中、 小分子化合物 非线性：细胞代谢过程用非线性方程描述。 复杂群体的生命活动 分批发酵：分批发酵是指在一封闭培养系统内含有初始限制量的基质的发酵方式。 特点：发酵液中的细胞浓度、基质浓度和产物浓度均随时间而不断变化。菌体整个生长过程分为延迟期、对数期、减速期、稳定期。 生物产物形成动力学分类：在分批发酵中根据产物的形成是否与菌体生长同步关联将其分为生长关联型和非生长关联型。 生长关联型：比产物形成速率随比生长速率的增长而增长。这类产物通常是微生物的分解代谢产物。如:根霉生产脂肪酶时，其产物浓度与菌体生长随时间的变化呈平行关系; 树状黄杆菌生产葡萄糖异构酶。 非生长关联型：产物形成速率与菌的生长速率无关、而与菌量有关。即菌体细胞量有关。 次级代谢产物中的一些抗生素的产物合成即属于这—类。 分批发酵的优点：可根据不同对象，掌握不同的工艺重点。对产物为细胞本身，可采用能支持最高生长量的培养条件；对产物为初级代谢物、可设法延长与产物关联的对数生长期；