分子生物学实验二.pptVIP

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  • 2016-12-30 发布于江苏
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分子生物学实验 实验二 植物组织DNA的提取 水浴锅 * * 一、实验原理 首先,必须破碎细胞壁释放出细胞内容物。分离总基因组DNA常用的破壁方法是将新鲜植物组织在液氮中快速冷冻后,用研钵将其磨成粉末。 其次,必须破坏细胞膜使DNA释放到提取缓冲液中。 最后,一旦DNA释放出来,其剪切破坏的程度必须要降到最低。剧烈振荡会打断溶液中相对分子质量高的DNA。 二、材料与设备 天平、研钵、离心管、65℃水浴、台式离心机(转速至少可达12000rpm) 三、试剂与配制 液氮 提取液 TPS: 100mM Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM EDTA (pH 8.0) 1 M KCl 氯仿(三氯甲烷) 异丙醇 70%乙醇 TE (pH 8.0): 10mM Tris-HCl (pH 8.0) 1 mM EDTA (pH 8.0) 四、实验步骤 1、用液氮将叶片研碎; 研磨 2、0.05g 样品于500u

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