超高效液相串联二级质谱的使用及银杏内酯样品检测.x综述.ppt

超高效液相色谱串联二级质谱的使用及银杏内酯样品检测 超高效液相色谱串联二级质谱的使用 一、超高效液相色谱串联二级质谱的基础知识 二、岛津LCMS8030液质联用仪系统组成 三、岛津LCMS8030使用规程 四、银杏内酯的检测分析 一、超高效液相色谱串联二级质谱的基础知识 超高效液相色谱串联二级质谱（UPLC-MS/MS）。UPLC-MS/MS将超高效液相色谱快速高效的分离能力与质谱的高选择性、高灵敏度的检测能力相结合。可以同时得到化合物的保留时间、分子量及特征结构碎片等丰富的信息。广泛应用于医药、生化、环境卫生和食品等领域。 超高效液相色谱的特点： 超高效液相色谱以耐高压的泵系统（一般在60Mpa以上）结合超高液相色谱专用色谱柱可以快速分离复杂的组分（一般10min以内）。 MS/MS的原理： 二级质谱是在一级质谱的基础上对经一级质谱选择分离的母离子进行碰撞断裂，并对碎片离子进行监测，可以同时得到分子量和特征结构碎片的信息。较一级质谱可以得到跟多关于目标物的信息。 三重四极杆 三重四极杆常用的监测模式 1.母离子扫描 2.子离子扫描 3.中性离子丢失扫描 4. Q3扫描 5.MRM监测 扫描方式 Q1 Q2 碰撞室 Q3 Q1全扫描 扫描a 通过所有离子b 通过所有离子b Q3全扫描 通过所有离子b 通过所有离子b 扫描a 子离子扫描 设定d 离子碎裂c, 然后通过所有碎片 扫描a 母离子扫描 扫描a 离子碎裂c, 然后通过所有碎片 设定d 中性丢失扫描 扫描a 离子碎裂c, 然后通过所有碎片 扫描a 扫描功能 注: 扫描a: 全扫描或选择离子传输 通过所有离子b 或碎片: 在设定的质荷比范围内通过所有离子或碎片 离子碎裂c: 通过与氩气碰撞使离子碎裂 设定d: 设定通过特定质荷比的离子 * 为分析物 1 / 碎片 1 设定 Q1, 碰撞室和 Q2 电压 等待片刻 (切换时间或扫描延迟时间) 为分析物 1 / 碎片 2 设定 Q1, 碰撞室和 Q2 电压 监测碎片1的信号 (驻留时间) 等待片刻 (切换时间或扫描延迟时间) 为分析物 2 / 碎片 1 设定 Q1, 碰撞室和 Q2 电压 等待片刻 (切换时间或扫描延迟时间) 监测碎片1的信号(驻留时间) 为分析物 2 / 碎片 2 设定 Q1, 碰撞室和 Q2 电压 等待片刻 (切换时间或扫描延迟时间) 监测碎片2的信号(驻留时间) 监测碎片2的信号(驻留时间) MRMs分析状态下的质谱仪工作流程 二、岛津LCMS8030液质联用仪系统组成 超高效液相色谱系统 ESI离子源 单触式安装或移除 位置调节旋钮: -2mm至+3 mm。 全新设计的锥形喷雾毛细管最大限度地减少了样品堵塞。 实现免工具维护。 三重四极杆 三、岛津LCMS8030使用规程 开机： （1）依次打开自动进样器，柱温箱，泵，氮气发生器以及CBM和电脑电源。等待仪器连接。 （2）打开LabSolutions主窗口，双击lcms8030，进入实时分析窗口，点击自动排气。等待排气完成。 测样 Q3扫描模式：点击文件，新建方法，创建Q3全扫描（即创建+/-两种扫描模式），设置扫描范围与扫描速度以及扫描时间（1min），设置Lc时间为1min，设置流动相比例和柱温箱温度。保存方法，下载方法。 点击单次分析，设置进样瓶号，样品架号，进样量为0.2ul。点击确定，进行分析。 MRM优化：新建方法，选择MRM模式，根Q3扫描结果，确定母离子，执行MRM优化。得到优化结果，保存方法。 检测：安装色谱柱，调用保存的优化的MRM方法，设置色谱条件，保存方法，下载方法，点击批处理，建立批处理方法，保存批处理，点击开始批处理。 数据分析：在LabSolutions主窗口点击Postrun，双击Browser，对数据进行处理。 关机 点击实时分析窗口中的lc，ms开关，关闭泵，柱温箱和质谱仪。等待加热模块温度降到50摄氏度左右，退出软件。关闭泵、柱温箱、自动进样器和CBM以及氮气发生器的电源。 四、银杏内酯的检测分析 实验目的 （1）熟悉岛津lcms8030液质联用仪的结构、分离检测原理和操作程序。 （2）掌握银杏内酯标样的分析方法。 实验原理 四种银杏内酯在经过超高效液相色谱分离后进入ESI电离源，经电离后进入Q1，在Q1中筛选出目标离子，目标离子在Q2中经碰撞破裂，碎片粒子进入Q3，Q3分析记录碎片粒子信息。从而同时得到目标物的保留时间，分子量，碎片信息等。 仪器和试剂 1.仪器：岛津lcms8030液质联用仪（配氮气发生仪） 1.材料：银杏内酯标准品 3