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(3).ES细胞也是理论上研究体外细胞分化的理想材料。 ES细胞在饲养层细胞上,或在添加抑制因子的培养液中,能够维持不分化的状态。 在培养液中加入分化诱导因子,就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化. * * 精子进入卵后 变化① 变化② 变化③ 产生卵黄膜封闭作用 形成第二道屏障 (作用?) 尾部脱离核膜破裂 形成雄原核 形成雌原核 激活卵子完成减数第二次分裂,排出第二极体 发育 移动 接触 合并 形成受精卵 受精作用的特点和实质 特点: 1、只有一个精子与一个卵细胞结合,形成一个受精卵。 2、进入卵细胞的只是精子的头部(细胞核) 3、受精卵的细胞质几乎都只来自卵细胞。 实质: 雄原核与雌原核 的融合。 五、胚胎发育 1、卵裂期的特点: 细胞分裂方式为_______ 细胞数目____ 胚胎总体积_____或略有___ 每个细胞体积_____, DNA总量_____但___________________ 有丝分裂 增加 不增加 缩小 减小 增加 每个细胞DNA含量不变 2、早期胚胎发育的几个阶段 桑椹胚: 囊胚: 原肠胚: 桑椹胚:细胞均属于全能细胞。 细胞开始分化;内细胞团将来发育成各种组织, 滋养层将来发育成胎膜、胎盘;出现囊胚腔后,进一步扩大会导致孵化。 原肠胚:内细胞团表皮的细胞形成外胚层,下方的细胞形成内胚层,出现原肠腔。 §3.2体外受精和早期胚胎培养 专题3:胚胎工程 1.试管动物技术 是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育成早期胚胎后,再经胚胎移植(到受体母亲体内)产生后代的技术。 采集良种母牛的卵母细胞 卵母细胞的体外培养 采集良种公牛精子 精子体外获能 体外受精 良种牛体外受精胚胎早期培养 胚胎移植 受体牛 良种犊牛 成熟期牛 屠宰加工厂 市场 采集卵巢中的 卵母细胞 “试管牛”工厂化生产的技术流程图 1.卵母细胞的采集和培养 用促性腺激素处理后,从输卵管中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精。 如:小鼠、兔、猪、羊等 方法一: 超数排卵法 1.卵母细胞的采集和培养 方法二: 从屠宰的母畜卵巢中直接采集卵母细胞。 适用于大家畜和大动物,如牛 牛卵巢中采卵 牛卵巢 方法三: 借助超声波探测仪、内窥镜、腹腔镜等工具,从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。 适用于大家畜和大动物,如牛 B超活采仪 方法二和三采集的卵母细胞需经体外人工培养成熟 卵母细胞的成熟培养:CO2培养箱 2.精子的收集和获能 1) 收集的方法: 假阴道法,手握法和电刺激等 2) 获能处理: 培养法:把精子放入获能液中。 (适用对象:啮齿动物、家兔和猪) 化学法:把精子放入一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中,化学药物诱导。 (适用对象:牛、羊) 3.受精 在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程 离心的目的是什么? 卵母细胞的培养的 目的是什么? 胚胎的早期培养 一般比较复杂 培养液: 水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等. ● 培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷动保存. 2.胚胎移植 1).概念: 将雌性动物的早期胚胎,或经体外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之发育为新个体的技术。 2).胚胎移植的现状和意义 (1)加速育种工作和品种改良; (2)大量节省购买种畜的费用; (3)一胎多产; (4)保存品种资源和濒危物种; (5)可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力,缩短繁殖周期,增加一生繁殖的后代数量。 3).胚胎移植的生理学基础 (1).供体和受体具相同的生理环境; (2).早期胚胎处于游离状态,为胚胎的收集提供了可能; (3).受体对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥; (4).胚胎与受体能建立正常的组织联系,但遗传物质没有改变。 选择 供体母牛 受体母牛 ……同期发情处理…… 超数排卵 供体公牛 配种 冲卵(胚胎) 胚胎质量检查、培养 胚胎移植 妊娠检查 分娩(胚胎移植的犊牛) 4)、胚胎移植的基本程序 3、胚胎分割 (1)胚胎分割的概念 (2)胚胎分割特点 (3)胚胎分割的理论基础 (4)胚胎分割操作过程 1).概念: 采用显微手术(机械方法)的方法将早期胚胎分割成2分胚,4分胚或8分胚,经体内或体外培养后植入受体,以得到同卵双胎或同卵多胎的技术。 2).特点: 后代具有相同的遗传物质,
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