毛细管电泳—安培检测技术在电活性与非电活性物质分析中的应用研究.docVIP

毛细管电泳—安培检测技术在电活性与非电活性物质分析中的应用研究 【摘要】：毛细管电泳(CapillaryElectrophoresis,CE),又叫高效毛细管电泳(HighPerformanceCapillaryElectrophoresis,HPCE),是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,根据样品中各组分间迁移速率的差异而实现分离的一种分离分析技术。在80年代中后期,毛细管电泳的应用得到了飞速发展。到目前为止,毛细管电泳已被广泛用于分离无机离子、中性分子、生物大分子等,涉及分析化学、食品化学、法医化学、临床化学、有机化学、药物化学、分子生物学等诸多学科领域。但毛细管电泳纳升级的进样量,以及微小的内径对检测器提出了特殊的要求。电化学检测技术(ED),特别是其中的安培检测技术(AD),因其较低的检测限,较高的灵敏度,较宽的线性范围和较低的成本在分析领域得到了广泛的应用。本论文探讨了毛细管电泳—安培检测技术(CE-AD)在中药分析、食品分析、生化分析中的应用研究,主要内容为以下三部分：第一部分绪论概述毛细管电泳的基本原理、分离机理、分离模式、分离行为、发展趋势和应用现状,并简要介绍本论文的目的和意义。第二部分毛细管电泳—安培检测技术在电活性物质分析中的应用研究第一章夏枯草中活性成分的毛细管电泳—安培检测方法研究本实验采用毛细管区带电泳—安培检测法同时测定了夏枯草中的6种活性成分—芦丁、伞形花内酯、金丝桃苷、对香豆酸、迷迭香酸和咖啡酸的含量。采用自组装的毛细管区带电泳—安培检测系统,75cm长熔融石英毛细管(内径25μm,外径360μm),直径300μm的碳圆盘工作电极,工作电极电位为+950mV(vs.SCE),分离电压为16kV,运行液为60mmol/L的硼酸盐缓冲溶液(pH9.0),进样时间为8s。在优化条件下,6种组分的浓度和峰电流在2-3个数量级范围内呈良好线性关系,最低检测限范围(S/N=3)为1.42x10-8-3.75x10-7g／mL。该法成功地将夏枯草中的上述6种活性成分进行分离和检测,得到了理想的结果。第二章香椿叶中活性成分含量随季节变化的毛细管电泳—安培检测方法研究本实验采用毛细管电泳—安培检测法测定了香椿叶中四种活性成分(表儿酸、莨菪亭、槲皮素和没食子酸)在四月份、六月份和八月份含量的变化。考察了诸如电极电势、缓冲液酸度和浓度、分离电压等实验参数对分离检测的影响,得到了最佳分离条件：采用直径300μm的碳圆盘电极作检测电极,检测电极电位为+950mV(vs.SCE),分离电压为16kV,运行液为40mmol/L(pH9.0)的硼酸盐缓冲液,分离在75cm长熔融石英毛细管(内径25μm,外径360μm)内完成。在上述优化条件下,被测组分得到了较好的分离,被测物浓度与峰电流在2-3个数量级范围内呈良好线性关系,最低检测限范围为(S/N=3)4.00x10-8-1.73×10-7g／mL。此法已被成功用于测定香椿叶中活性成分含量随季节变化的情况,结果令人满意。第三章毛细管电泳—安培检测法测定猪饲料、猪尿和猪肝中的违禁添加剂瘦肉精及其替代品的方法研究本实验采用毛细管电泳—安培检测法分析了实际样品中的瘦肉精克伦特罗,及其替代品美托洛尔、莱克多巴胺、异舒普林和沙丁胺醇的残留量。考察了实验参数对分离和检测的影响。在优化条件下,五种被测瘦肉精在分离电压为14kV,100mmol/LH3BO3-Na2B4O7缓冲溶液中(pH9.0)实现了较好的分离,被测物浓度与峰电流在2-3个数量级范围内呈良好线性关系,最低检测限范围(S/N=3)为3.10×10-7-5.90×10-7g／mL。此法已被成功用于测定猪饲料、猪尿和猪肝中的五种常用违禁添加剂,为监管非法使用瘦肉精及其替代品提供了一种可选择的新检测方法。第四章毛细管电泳—安培检测法研究烧烤对向日葵籽中维生素C和绿原酸含量的影响用毛细管区带电泳—安培检测法研究了烧烤对向日葵籽中维生素C和绿原酸含量的影响,考察了实验参数对分离、检测的影响,得到了最佳实验条件。以直径300μm的碳圆盘电极为检测电极,电极电位为+950mV(vs.SCE),在40mmol/L硼酸盐缓冲溶液(pH8.7)中,上述两组分在15mmin内实现了基线分离。维生素C和绿原酸的标准品浓度与峰电流均在5.0x10-7-1.0x10-4g/mL范围内呈良好的线性关系,检测下限分别为2.00×10-7g／mL、2.25×10-7g/mL,7次测得峰高的相对标准偏差分别为3.2%和3.7%,三次测得的平均回收率分别为102.0%和104.4%(生向日葵籽),94.0%和97.7%(熟向日葵籽)。熟向日葵籽与生向日葵籽相比,维生素C和绿原酸的含量分别下降约24%和18%。第五章胶束电动毛细管电泳—安培检测法测定废