酶工程复习资料.docxVIP

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  • 2016-12-31 发布于贵州
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有毒环境等极端条件下,由于酶分子空间构象的改变而引起酶的特性和功能的变化情况。b提高酶的催化活性,增强酶的稳定性或者是酶的催化动力学特性发生某些改变。1.常用的固定化方法主要有哪些?1.吸附法2.包埋法3.结合法4.交联法5.热处理法2.何谓固定化酶?经过固定化以后,酶的特性有哪些改变?固定化酶:固定在载体上,并在一定空间范围内进行催化反应的酶称为固定化酶。改变有:稳定性:固相酶的稳定性比游离酶高,主要表现在:(1)热稳定性:固定化酶热稳定性较之天然酶提高。(2)对蛋白酶水解作用稳定性:固相酶比天然酶有更强的抵抗蛋白酶水解作用的能力。(3)对变性试剂作用的稳定性:固相酶对各种蛋白变性剂的稳定性,一般都比天然酶强。(4)保藏稳定性:固相酶比天然酶保存的时间更长。最适温度:(1) 固相酶的最适温度一般比天然酶高,个别会有所降低(2) 同种酶,采用不同的方法或不同载体固定化后,其最适温度可能不同最适pH:酶经固定化后,其作用的最适pH常会发生偏移影响固定化酶最适PH的因素主要有两个。(1) 载体性质对最适pH影响:用带负电荷载体制备的固定化酶,最适pH比游离酶最适pH高。用带正电荷载体制备的固定化酶,最适pH比游离酶最适pH低。用不带电荷载体制备的固定化酶,最适pH一般不改变。(2) 产物性质对最适pH影响;若酶催化反应产物为酸性时,固定化酶最适pH比游离酶的最适pH要高。若酶催化反应产物为碱性时,固定化酶最适pH比游离酶的最适PH要低。若酶催化反应产物为中性时,固定化酶最适pH不变。底物特异性:固定化酶底物特异性与游离酶相比,有一定变化,一般为:作用于小分子底物的酶类经固定化后,专一性基本不变。而既可作用大分子也可作用小分子底物的酶类经固定化后专一性会发生变化。3.举例说明固定化酶在工业上的应用?现已用于工业化生产的固定化酶主要有:(1) 氨基酰化酶:这是世界上第一种工业化生产的固定化酶。降低生产成本(2) 葡萄糖异构酶:这是世界上生产规模最大的一种固定化酶。常用于连续生产果葡糖浆(3) 天门冬氨酸酶:用于工业生产。将延胡索酸转化生产L-天冬氨酸(4) 青霉素酰化酶:这是在医药工业上广泛应用的一种固定化酶。用于制造各种生产半合成青霉素和头孢菌素4.什么是固定化细胞?固定化细胞有何应用?定义:固定在载体上,并在一定空间范围内进行生命活动的细胞,称为固定化细胞。固定化细胞能进行正常的生长、繁殖和新陈代谢,故又称为固定化活细胞或固定化增殖细胞。应用:1、利用固定化微生物细胞生产各种能够分泌到细胞外的产物:(1) 酒精酒类:(2) 氨基酸:(3) 有机酸:(4) 酶和辅酶(5) 抗生素(6)固定化微生物细胞还可以用于甾体转化及有机溶剂、维生素、化工产品等的生产。2、固定化微生物细胞制造微生物传感器:分为呼吸活性测定型和电极活性测定性两种固定化植物细胞的应用。(1)制造人工种子(2)用于生产各种色素、香精、药物、酶等次级代谢物。3、固定化动物细胞的应用:主要应用于生产小儿麻痹症疫苗、狂犬病疫苗等5.何谓固定化原生质体?固定化原生质体有何特点?将微生物细胞和植物细胞去细胞壁后,可得原生质体,将此原生质体用多孔凝胶包埋,即为固定化原生质体。特点:(1) 促进胞内物质分泌到胞外。(2) 有利于氧的传递,营养物质的吸收。1.何谓酶的非水相催化?非水相中酶的特性和酶促反应的特点是什么?定义:酶在非水相介质中进行的催化反应称为酶的非水相催化。非水相中酶的特性:底物专一性、对映体选择性、区域选择性、键选择性、热稳定性、PH值特性非水相中酶促反应的特点:a.对酶的要求高b.底物的选择和浓度有控制c.有机溶剂的选择d.水含量的选择e.温度控制fPH的控制2.为什么在非水相中酶仍然可以保持催化活性和稳定性?并非酶都怕有机溶剂,有些酶在特定的非水相中仍可催化。此时酶仍保持基本结构及解离状态。根据酶的特性及反应需要,有多种非水相体系,如两相互溶体系、低水有机相体系、反相微团等,酶的状态各有不同3.有机溶剂中如何调节酶的催化活性和选择性?主要应控制的条件有:a.酶的种类和浓度b.底物的种类和浓度c有机溶剂的种类d.水含量e.温度f.pH ;g.离子强度1.酶反应器有哪些主要类型?按结构区分:搅拌罐式反应器;鼓泡式反应器;填充床式反应器;流化床式反应器;膜反应器。按操作方式区分:分批式反应;连续式反应;流加分批式反应。按混合形式分:连续搅拌罐反应器;分批搅拌罐反应器。2.如何选择酶反应器?影响酶反应器选择的因素很多,但一般可以从以下几个方面考虑:a.酶的形式(游离/固定化.)b.固定化酶的形状c.底物的物理性质d.酶反应动力学性质e.酶的稳定性f.操作要求g.反应器制造、控制成本3.酶反应器的设计主要包括哪些内容?1、确定酶反应器的类型。酶反应器的设计,首先要根据酶、

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