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第一篇 生命的分子基础 本章大纲要求 掌握:糖的概念、重要多糖的基本结构、性 质和生理功能。 熟悉:多糖的提取、分离、纯化和分析的基本 原理。 了解:多糖结构分析的基本原理。 第一节 概述 (二)糖的主要生物学作用 1、糖是人和动物的主要能源物质 2、糖还具有结构功能 3、糖具有复杂的多方面的生物活性功能 如:参与生物大分子构成、提高免疫 力,抗肿瘤等。 1、单糖(monosaccharide)凡不能被水解成 更小分子的糖称为单糖。 与人体营养及代谢有关的单糖: ⑴丙糖 ⑵丁糖 ⑶戊糖 ⑷已糖 ⑸庚糖 第二节 多糖的化学 一、多糖的分类 (一)多糖按其来源的分类 1、植物多糖 2、动物多糖 3、微生物多糖 4、海洋生物多糖 (二)多糖按其在生物体内的生理功能分类 1、贮存多糖 2、结构多糖 (三)多糖按其组成成分分类 1、同聚多糖 2、杂聚多糖 3、黏多糖 二、重要多糖的结构与生理功能 1. 淀粉(植物) 2. 糖原(动物) 4. 纤维素 三、多糖分离、纯化及降解的原理 多糖的一般分离过程 1、Sevag法(氯仿:正丁醇=4:1)、5%三氯醋酸、蛋白酶水解等方法去除蛋白质杂质。 2、活性炭、离子交换树脂等吸附剂吸附或者双氧水氧化去除色素。 3、乙醇沉淀多糖。 (二)多糖的纯化方法 (三)多糖的降解 四、多糖理化性质测定 (三)多糖的分子量测定 1、凝胶柱层析法 在不同型号的分子筛柱层析上测定多糖分子量需要样品较少,方法比较简便。 2、特性黏度法 是实验室常用的测定多糖分子量的方法。 五、多糖结构分析的基本原理 (一)多糖组成成分分析 1、酸水解 又包括完全酸水解和部分酸水解。酸水解产物可用纸层析,薄层析和气相层析等鉴定。 2、乙酰解 3、甲醇解 (二)多糖结构的甲基化分析 (三)多糖结构的过碘酸氧化及Smith降解 过碘酸氧化反应是一种选择性的氧化降解反应,能够作用于多糖分子中1,2- 二羟基和1,2,3-三羟基而生成相应的醛或甲醛、甲酸。 1、1,2-连接糖苷键 1,2-连接的多糖经高碘酸氧化→及硼氢化钠还原→经稀酸盐水解→生成甘油和甘油醛。 2、 1,3-连接糖苷键 1,3-连接的多糖与高碘酸不起反应,经还原,水解后得到原来的多糖。 (四)多糖结构的酶降解测定方法 1、外切糖苷酶 六、糖链与糖蛋白的生物活性 1、糖链与酶活性 糖链在酶的新生肽链折叠、转运和保护等方面普遍起作用。 2、糖链与激素活性 体内有多种糖蛋白激素,如FSH、LH、TSH等。 3、糖链与IgG活性 每分子IgG平均含糖链约三条。 4、糖链介导的细胞识别功能 1、分级沉淀 2、季铵盐络合法(CTAB法) 3、离子交换层析 4、制备性区带电泳 5、固定化凝集素的亲和层析法 多糖的降解方法主要有以下几种: 1、化学降解法 如:肝素、甲壳素的化学降解法。 2、酶法降解 3、辐射降解法 (一)多糖的含量测定 可采用硫酸-蒽酮法或硫酸-苯酚法: 蒽酮试剂与多糖置沸水中10min后呈蓝绿色, 在620nm处有最大吸收;可通过比色分析或查 标准曲线计算多糖的含量。 1、电泳法 2、凝胶柱层析法 3、紫外扫描法 4、其它方法如:官能团分析、纸层析等。 (二)多糖的纯度分析 3、 1,4-连接糖苷键 1,4-连接多糖经高碘酸氧化,还原,水解后最终产物是赤藓醇和乙醇醛。 4、 1,6-连接糖苷键 1,6-连接多糖经高碘酸氧化,还原,水解后最终产物是甘油和乙醇醛。 2、内切糖苷酶 * * 第一章 糖的生物化学 一、糖的概念、分布及主要生物学作用 (一)糖的概念、分布 概念:糖是多羟基醛或多羟基酮及其多聚物 和衍生物的总称。 分布:植物体内主要以淀粉的形式存在;动 物体内以糖原的形式存在。 此外还有糖脂、糖蛋白等。 二、糖的分类 单糖结构 ?-D-
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