第七组免疫研讨.pptVIP

实验证据的逻辑是否严密？ ——免疫学专题研讨 作者研究的是记忆CD8 T细胞在MHC类I缺陷小鼠中的持续性。 根据感染了淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（LCMV）的成年小鼠能够在两周内自愈，并且能够表现出长期的CD8 + T 记忆。在维持CD8记忆过程中，去判定或者判断MHC I类分子的需要。研究者从Thy1.11 LCMV获得免疫荧光激活细胞（FACS）分选纯化的CD8 + T细胞，把细胞转移到 MHC class I–positive (b2M1/1) 或 MHC class I–deficient (b2M2/2) 同类系的 Thy1.21小鼠中。 成年小鼠感染脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)2周,然后表现出长期的CD8 T细胞记忆的急性淋巴细胞 为了确定类MHC分子在维护我们获得 CD8记忆的需求，我们从(99%)Thy1.11 LCMV获得荧光激活纯化 CD8 T细胞并把它转移到MHC类I-positive(b2M1/1)或MHC类 I -deficient (b2M2/2)同类系Thy1.21老鼠。在转移之前,对FACS-purified CD8 T细胞的存在进行了病毒测试，发现没有任何检测病毒材料。 外周T细胞在淋巴细胞减少的情况下能通过稳定增殖来重组空的免疫系统。当已经达到淋巴细胞体内平衡，停止初始型细胞增殖,而为了保持的记忆细胞，记忆细胞以较低的速度继续分裂 。 我们试图去确定在MHC1类分子缺乏的小鼠体内在达到淋巴稳态之后，相对数量稳定的记忆性的CD8细胞是否还在增值，又或者失去了细胞分裂的能力。 因此，CD8记忆T细胞不仅能存在于b2M2/2老鼠体内,并且在严重缺乏MHC1类分子的环境中也能稳定的增殖。 在上述实验中CD8 + T细胞均来自b2M1 / 1小鼠。感染的CD8 + T细胞和MHC1识别导致记忆CD8 T 记忆细胞在b2M2/2鼠上的存活是不太可能的，因为仅约0.5至1 ％传染至脾的细胞存活。 尽管如此，为测试这种可能性，我们用已接种 LCMV 的嵌合体小鼠（ b2M2 / 2骨髓转移到 b2M1 / 1小鼠）的MHC I类缺陷 CD8 + T细胞做了继承性转移实验. 因此， MHC I类分子缺陷的记忆CD8 + T 在b2M2 / 2小鼠存活，过继转移“满”（即未照射）小鼠后可见到记忆细胞的存活。 作为一个关于存活的缺乏MHC-I分子记忆T细胞更为严谨的实验，我们接下来用Db2/2 3 Kb2/2 3b2M2/2小鼠作为受试对象。 综合起来讲，这些结果显示了即使小鼠完全缺失经典的MHC-I分子（Kb和Db）和b2M，CD8记忆T细胞仍能增殖并存活较长时间。 记忆性 T 细胞又一个特点：就是他们能够快速表达出反应后的二次暴露抗原。对利用同源性肽段刺激后4 小时的LCMV (淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒)特异性 T 细胞使用记忆性 CD8+分子、IFN-γ（丙种干扰素）并观察现象。却产生了相反的结果：已经使用IFN-γ刺激的CD8+T细胞在24 小时以后产生的信号分子基本表达量仍然较低。 因此我们便研究记忆性CD8+ T细胞是否具有DB2／2，3／2／3 b2m2 KB22小鼠的持续性保留能力，我们将记忆性 CD8+ T 细胞快速接触抗原使其产生细胞重复应答，并检测其 MHC 的类型，或是通过此方法使记忆性 CD8+ T恢复到那未分化发育成熟的 T 细胞的状态。 因此，在记忆性 T 细胞被激活之后，他们不再需要再次接触MHC I类分子来维持他们的“准备型应答”模式。此外，记忆T细胞对多种表位缺乏MHC I类应答，和1／1和2／2小鼠的免疫应答的表位层次相同 记忆性T细胞的一个特点是他们的再次接触后表现出快速的功能反应抗原的能力（2,4）。LCMV特异性记忆CD8 T细胞产生干扰素-G（IFN-G）刺激在与同源肽后4小时内（2）。与此相反，幼稚CD8 + T细产生IFN-γ在超过24小时后，还产生显着较低量（2，4，8）。 因此，我们研究是否记忆CD8 + T 细胞坚持在D b2/23K B2/2 3b2M2/2 小鼠保留做出迅速的细胞因子的能力在再次接触抗原和MHC I类，或恢复到一个幼稚T细胞表型反应后。 因此，在记忆T细胞产生后，他们不再需要接触MHC I类分子，以维持它们的“响应就绪”模式。此外，记忆对多个表位的反应被保持在缺乏MHCⅠ类，表位层次结构是相同的in在1/1和2/2小鼠中。 与我们的结果一致的是，最近两个关于表达特异性识别HY抗原的TCR转基因的CD8 T cell的研究显示，特异性的抗原并不是维持记忆性T cell 所必需的。然而，这份报告中同样显示MHC--1 类分子却在其中扮演了重要的角色。这一结论不同于我们