第八章 微生物遗传.pptVIP

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第八章 微生物遗传 (1)基因型(Genotype)或遗传型: 第一节 遗传变异的物质基础 一.证明核酸是遗传物质基础的三个经典实验 (1)动物试验 (2)细菌培养试验 (3)S型菌的无细胞提取液试验 2.噬菌体感染试验 3.植物病毒的重建实验 二.遗传物质在胞内的存在部位及方式 (1)细胞水平 (3)染色体水平 (4)核酸水平 (5)基因水平 (7)核苷酸水平 2.原核生物的质粒(Plasmid) (3)质粒的特性 (4)质粒的类型 第二节 基因突变和诱变育种 一.基因突变 1.突变的类型 (1)营养缺陷型(Auxotroph) (3)条件致死突变型(Conditional lethal mutant) (5)抗原突变型(Antigenic mutant) 2.突变率(Mutation rate) 4.基因突变的自发性和不对应性的实验证据 (2)涂布试验(Newcombe experiment) (3)平板影印培养试验(Replica plating) 5.基因突变的机制 (1)诱变的机制 碱基置换(Substituttion) 移码突变(frame-shift or Phase-shift mutation) 染色体畸变(chromosomal aberration) (2)自发突变机制 ①背景辐射和环境因素的诱变 ④环出效应 6.紫外线对DNA的损伤及其修复 (1)光复活作用 二.突变与育种 2.诱变育种 (1)诱变育种的基本环节 (2)诱变育种的几个原则 3.营养缺陷型突变株的筛选 (2)与营养缺陷型突变有关的三类遗传型个体 (3)营养缺陷型的筛选方法 第三节 基因重组 一.原核生物的基因重组 1.转化(Transformation) (1)感受态阶段 (2)DNA的结合与吸收 转染 2.转导(Transduction) (1)普遍转导(Generalized transduction) ①完全普遍转导 ②流产普遍转导 (2)局限转导(Restricted transduction) (3)溶源转变(Iysogenic conversion) 3.接合(Conjugation) (1)F+(雄性)菌株 (3)Hfr菌株(高频重组菌株,high frequency recombination) (4)F’菌株 4.原生质体融合(Protoplast fusion) 原生质体融合的主要步骤: 第四节 菌种的衰退、复壮和保藏 一.菌种的衰退与复壮 衰退的防止 1.衰退的防止 (3)利用不同类型的细胞接种传代 2.菌种的复壮 (2)转入宿主体内生长进行复壮 二.菌种的保藏 噬菌体将供体菌的染色体DNA片段误包形成缺陷噬菌体,这种噬菌体再将其中的DNA导入受体菌,经过与受体菌染色体组上的同源区段配对、双交换,而将供体菌DNA整合到受体菌的染色体组上,从而使后者成为一个遗传性状稳定的转导子的现象,称为完全转导或普遍转导。 经转导获得供体菌DNA片段的受体菌,如果外源DNA在其内既不进行交换、整合和复制,也不迅速消失,而仅进行转录、转译和性状表达,这种现象称为流产转导。 发生流产转导的细胞在分裂后,只能将外源DNA分配给一个子细胞,而另一子细胞可获得供体基因经转录、转译形成的少量产物——酶,因此在表型上仍可出现轻微的供体菌特征,每经过一次分裂,就受到一次“稀释”。所以,能在选择性培养基平板上形成一个微小菌落(即其中只有一个细胞是转导子)就成了流产转导子的特点。 1954年在E.coli K12菌株中发现此现象。   是指通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌中,并获得表达的转导现象。 根据转导子出现频率的高低可将其分成两类:低频转导和高频转导。 以低频转导为例说明: 温和噬菌体感染供体菌后,可使供体细胞溶源化,当该供体菌发生诱导裂解时,由于极少数(10-5)的前噬菌体发生不正常切离,其结果会将插入位点两侧之一的少数宿主基因(如E.coli λ前噬菌体的两侧分别为gal基因和bio基因)连接到噬菌体DNA上,通过衣壳的“误包”,就形成了缺陷噬菌体(Defective phage)。当这种缺陷噬菌体再次感染宿主细胞时,可整合到宿主的核基因组上,使宿主细胞成为一个局限转导子(即获得了供体菌的gal或bio基因),而不是一个溶源菌,因而对λ噬菌体不具有免疫性。   如白喉棒状杆菌(Corynebacterium diphtheriae)和肉毒梭菌(Clostridium botulinum) 当温和噬菌体感染宿主而使其发生溶源化时,因噬菌体的基因整合到宿主的核基因组上

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