第六节 木脂素类成分分析.pot.ppt

木脂素是一类在生物体内由二分子苯丙素衍生物聚合而成的化合物。 具有多方面的活性 （一）结构特征 组成木脂素的单体C6-C3 （苯丙素） 木 脂 素 是 由 两 分 子苯 丙 素 衍 生 物 聚 和 而 成的！ （二）理化性质 1. 物理性质 无色结晶 一般无挥发性 有光学活性 *多数是游离体 游离木脂素易溶于有机溶剂 具酚羟基木脂素可溶于强碱水溶液 *少数可与糖结合成苷 木脂素苷类可溶于水 TLC 薄层板 硅胶G 展开剂 苯、三氯甲烷 三氯甲烷-甲醇（9:1） 显色剂 香草醛硫酸 10%硫酸乙醇溶液 5%~10%磷钼酸乙醇溶液 碘蒸气 五味子中木质素类成分的鉴别-薄层色谱法 主要组成 五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素 鉴别方法 供试品溶液的制备：取本品20 mg，加甲醇20 mL，加热 回流30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2 mL 使溶解，作为供试品溶液。 对照药材溶液的制备：另取对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。 对照品溶液的制备：再取五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素对照品，加甲醇分别制成每1 mL 含1.2，0.7，0.5 mg 的溶液，作为对照品溶液。 薄层鉴别：照薄层色谱法[1]，吸取上述对照品溶液5 μL、供试品溶液10 μL及对照药材溶液2 μL，分别点于同一硅胶GF254 薄层板上，以甲苯-乙酸乙脂-乙酸(9∶1.5∶0.2)的上层溶液为展开剂，展开，取出，置紫外灯(254 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，显示相同颜色的斑点。 （一) 总木脂素成分含量测定的方法 变色酸比色法、二阶导数光谱法、 柱色谱-比色法 （二）单体木脂素成分含量测定的方法 薄层色谱法、高效液相色谱法 色谱条件　 色谱柱:HypersilODS C18柱(4. 6mm×250 mm, 10μm),大连依利特科学仪器有限公司;流动相:A为乙腈, B为水,梯度洗脱(表1); 流速: 1. 0 mL/min;柱温: 25℃;检测波长: 254 nm。 对照品溶液制备　精密称取五味子醇甲对照品0. 006 2 g、五味子酯甲对照品0. 004 8 g、五味子甲素对照品0. 004 9 g、五味子乙素对照品0. 004 5 g,分别置于25 mL容量瓶,加甲醇溶解,即得,置冰箱内保存,备用。 对照药材溶液制备　精密称取五味子对照药材0. 219 0 g,置25 mL容量瓶,加甲醇超声提取30 min,冷却,加甲醇定容,摇匀,即得。 供试品溶液制备　精密称取五味子配方颗粒约1 g(或约1. 5 g),置25 mL容量瓶加甲醇超声提取30 min,冷却,加甲醇定容,摇匀,即得。 五味子饮片溶液制备　精密称取浙江产、辽宁产五味子饮片各约6 g,置100 mL容量瓶加甲醇超声提取30min,冷却,加甲醇定容,摇匀,即得。另取浙江产、辽宁产五味子饮片捣碎,精密称取各约6g,同上处理。 精密量取五味子醇甲储备液、五味子酯甲储备液、五味子甲素储备液、五味子乙素储备液,分别以甲醇配制系列浓度溶液: 五味子醇甲(24. 8、37. 2、49. 6、62. 0、74. 4μg/mL)、 五味子酯甲(19. 2、28. 8、38. 4、48. 0、57. 6μg/mL)、 五味子甲素(19. 6、29. 4、39. 2、49. 0、58. 8μg/mL)、 五味子乙素(18. 0、27. 0、36. 0、450、54. 0μg/mL)。按上述色谱条件依法进样10μL,测峰面积。以相应的峰面积Y为纵坐标,进样浓度C(μg/mL)为横坐标绘制标准曲线,计算回归方程。五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素的回归方程(n=5)分别如下,对照品色谱图见图1。 Y=2. 01×104C-7. 21×104r=0. 998 98 Y=1. 18×104C-4. 22×104r=0. 998 78 Y=1. 99×104X-8. 80×104r=0. 998 42 Y=1. 96×104X-1. 09×105r=0. 998 72 取混合标准品溶液,重复进样5次,测定峰面