流式细胞术在白血病诊断中的应用讲述.ppt

流式细胞术在白血病诊断中的应用 四川大学华西医院血液科 朱焕玲 一 简介 FCM：集激光、电子、光电测量、计算机、荧光化学、单抗的高科技仪器。 对处在快速直线流动状态中的单个细胞或生物颗粒进行多参数的、定量分析和分选的技术。 分两类：台式机（临床型） 大型机（cell sorting).科研用。 FCM的结构 FCM的结构 细胞流动室； 光源； 聚光系统； 信号检测器； 电子计算机； 细胞分选装置。 数据的存储、显示与分析 数据的存储：listmode 显示： 单参数直方图(histgram); ：常用于分析DNA等； 双参数：二维点图等（dot plot) ； 等高图：(contour) 三维等高图：3D plot 设门（gating): Data Acquisition - Listmode Immunofluorescence FCM检测常用参数内部参数—散射光测定 前向角散射(forward scatter FSC):与激光束平行的信号。与被测细胞大小有关。 侧向角散射（side scatter SSC):与激光束呈90°的光信号。与细胞内结构和颗粒物质多少有关。 采用FSC、SSC组合，可区分淋巴细胞、单核细胞、粒细胞等群体。 FCM常用参数外部参数—荧光测量 荧光素探针标记的细胞所发荧光。 荧光信号强弱、多少与细