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高二生物第十四篇 生物实验 一 成分分离鉴定 1 生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 【知识网络】 一、实验原理 1．可溶性还原糖+ 斐林试剂　　　　　砖红色沉淀（Cu2O）。 2．脂肪小颗粒 + 苏丹Ⅲ（苏丹Ⅳ）染液→橘黄（红）色小颗粒。 3．蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色反应。 二、目的要求 1．了解生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的存在； 2．初步掌握鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。 三、材料用具 （一）实验材料 1．可溶性还原糖的鉴定实验:选择含糖量较高、颜色为白色或近白色的植物组织，以苹果、梨为最好。 2．脂肪的鉴定实验:选择富含脂肪的种子，以花生种子为最好(实验前浸泡3h～4h)。 3．蛋白质的鉴定实验:可用浸泡1d～2d的黄豆种子(或用豆浆、或用鸡蛋蛋白)。 四、仪器、试剂 1．仪器：剪刀、解剖刀、双面刀片、试管、试管架、试管夹、大小烧杯、小量筒、滴管、玻璃漏斗、酒精灯、三脚架、石棉网、火柴、研钵、石英砂、纱布、载玻片、盖玻片、毛笔、吸水纸、显微镜。 2．试剂： （1）斐林试剂(0.1g/L的NaOH溶液+ 0.05g/mL的CuSO4溶液)；（2）苏丹Ⅲ染液；（3）双缩脲试剂；（4）体积分数为50%的酒精溶液；（5）蒸馏水。 五、方法步骤 1．还原糖的鉴定步骤: 选材（含还原糖多、白色或近白色的植物组织）→制备组织样液（洗涤→研磨→过滤→收集）→注入组织样液2ml→加斐林试剂2ml（先混合后加入）→水浴加热煮沸2min→观察溶液颜色变化（浅蓝色→棕色→砖红色）→结论（有还原糖）。 2．脂肪的鉴定步骤：取材［花生种子（浸泡3-4h）,将子叶削成薄片］→制片（取理想薄片→在薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ染液→去浮色→制成临时装片）→观察（先在低倍镜下，找到材料的脂肪滴，然后，转为高倍镜观察。）→结论（细胞中的圆形脂肪小颗粒已经被染成橘黄色。） 3．蛋白质的鉴定步骤：选材→呈色反应［组织样液 （或蛋白稀释液）2ml→双缩脲试剂A液2ml→双缩脲试剂B液4 ～5滴］→结论（蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应） 【考点透视】 一、考纲指要 通过动手操作《鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质》的实验，了解生物组织中还原 糖、脂肪、蛋白质的存在；并初步掌握水浴加热、徒手切片等实验技术。 二、命题落点 1．鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的基本步骤 2．斐林试剂的使用方法，生物组织中还原糖与斐林试剂反应的颜色变化 3．脂肪鉴定实验中，染色与去浮色的方法、显色结果 4．蛋白质鉴定实验中，双缩脲试剂的使用方法、显色结果 5．斐林试剂与双缩脲试剂的成分、使用方法的异同 【典例精析】 例1：可用于鉴定生物组织中还原糖的试剂是 （ ） A．斐林试剂 B．双缩脲试剂 C．苏丹Ⅲ染液 D．苏丹Ⅳ染液 解析：生物组织中还原糖的鉴定使用斐林试剂，双缩脲试剂用于蛋白质的鉴定，苏丹Ⅲ染液和苏丹Ⅳ染液都用于脂肪的鉴定。答案：A。 例2：下列哪个实验用到显微镜 （ ） A．还原糖的鉴定 B．蛋白质的鉴定　　 C．脂肪的鉴定 D．淀粉的鉴定 解析：在脂肪的鉴定实验中，被染色的脂肪颗粒很小，必须用显微镜才能观察到染色结果。答案：C。 例3：下列哪组试剂在使用过程中，必须经过加热 （ ） A．斐林试剂鉴定还原糖的过程中 B．苏丹Ⅲ和苏丹Ⅳ染液在鉴定动物组织中的脂肪时 C．双缩脲试剂鉴定蛋白质时 D．碘化钾溶液鉴定淀粉时 解析：在还原糖的鉴定实验中，斐林试剂与还原糖的反应必须在加热的情况下反应才能迅速完成，效果明显。答案：A。 例4：用苏丹Ⅲ染液对脂肪组织进行染色时，可用来冲洗浮色的药品是 （ ） A．吸水纸 B．H２Ｏ C．50%的酒精 D．无水酒精 解析：在脂肪的鉴定实验中，苏丹Ⅲ染液不仅能够使脂肪染色，而且其它组织也能因物理吸附而被染色，故需用50％的酒精来冲洗浮色。答案：C。 例5：根据生物组织中的有机物与某些化学试剂相互作用能产生颜色反应的原理，可以鉴定生物组织中某些有机物的存在。填写下表中的空格。 需鉴定的有机物 用于鉴定的试剂 反应产生的颜色 还原糖 斐林试剂 蛋白质 紫色 脂肪 苏丹Ⅲ染液 淀粉 碘液 解析：生物组织中还原糖的鉴定使用斐林试剂，加热后呈现砖红色沉淀；双缩脲试剂用于蛋白质的鉴定，其显色结果是紫色；苏丹Ⅲ染液用于脂肪的鉴定，显色结果是橘黄色；淀粉遇到碘液变蓝色。　 答案： 需鉴定的有机物 用于鉴定的试剂 反应产生的颜色 砖红色 双缩脲试剂 橘黄色 蓝色 【常见误区】 1．误以为斐林试剂与还原糖在不加热的情况下也有砖红色沉淀产生，其实必须加热后才能产生砖红