GPC操作规程..docVIP

排阻色谱SEQ分析 排阻色谱SEQ分为GPC（凝胶渗透色谱）和GFC（凝胶过滤色谱）GPC主要用于聚合物领域，GFC主要用于生物科学领域。 以下介绍岛津GPC分析系统特点： ★以分子量大小分离：分子量大的先洗出，小的后洗出。按保留时间计算分子量分布。 ★专用色谱柱分类： ●以分子量大小分类（表明分离线性范围）。 ●以流动相分类 使用四氢呋喃作流动相。 使用DMF作流动相。（二甲基甲酰胺） 使用氯仿作流动相。 使用水性溶液作流动相。 根据色谱柱线性分布，色谱柱可以串连使用，先连接分子量大的，再接分子量小的。 岛津GPC Vol.1.02软件操作 首先，在CLASS-VP中对标准品进行色谱分析，优化积分后，得到理想的色谱图和数据，即去掉杂质峰和负峰（Method∈ Integration Events中Min Area最小峰面积，Intergate off 禁止积分，WIDTH半峰宽 等等）。然后进入GPC分析软件： 点击开始∈程序∈GPC∈GPC for CLASS-VP 出现下面对话框： 在Data filename下为从CLASS-VP中由色谱文件（***。dat）转换成的对应GPC文件起名 和排序号 ******.D** （如DLSICA。D01）。 然后点击OK 进入下面菜单： 在窗口中有以下七个处理功能图标： GPC GPC Mol GPC Super Single File configuration Method Weight Batch Impose Chrmatogram Manager GPC配置 GPC方法 分子量 批处理 叠加 单色谱 文件管理 上述图标中选择 GPC GPC方法 即可以满足日常分析应用。 Method 2．下面再返回到CLASS-VP工作站中操作，先将其它界面最小化，如图： 如图：选择File∈Data∈Open打开标准品色谱数据 选择数据文件后，打开 选择File∈Method∈Open 打开分析该标准品的方法（已优化积分完毕） 选择Analysis∈Analyze 分析计算该标准品一次。 3．点击最下方图标栏中的GPC for CLASS-VP图标，如图： 进入下面界面： 双击GPC方法 图标，进入下面菜单： 该菜单分为三部分： Calibration Curve Table为校准曲线表，编辑标准品保留时间Time，分子量Molecular等参数 Calibration Curve（Linear）标定后，显示校准曲线。 Chromatograph 显示打开的标准品GPC格式图谱。 4．如图选择File∈Load LC Data file 选择（2）中分析标准品时转换的GPC数据文件，确定 后显示下面界面： 点击该界面中的 GET 键，得到下面界面： 提问是否Clear Calibration Table ？（清除现在的校准表？）选择 是 显示下面界面： 在Calibration Curve Table校准曲线表中的Molecular 项中，分别键入各个组分峰的分子量 然后点击该表左下角的 Draw 显示得到拟合曲线的界面： 在该界面（Calibration Curve（Linear）中，显示标定后的校准曲线。如果校准曲线拟合的不理想，可以点击该曲线左下角的 Type 键，显示下面界面，选中合理的拟合类型： 点击 OK 得到下面重新拟合后的曲线： ●修正： *如果样品与标准品一致（例如皆为聚苯乙烯）则不需修正。 在上面界面中选择Parameter∈GPC Parameter 如图： 出现下面界面： Name Q factor V---α V---k 样品名 粘度系数 标准品α值 标准品k值 如无则粘度系数Q和α， k 皆输入1 ，点击 OK 校准曲线立即得到修正。 *如果样品与标准不一致（标准与样品不一致）则需修正。 在上面界面中选择Parameter∈MH Conversion如图： 出现下面界面： V—α 粘度系数（据MH公式手册查出键入），V—k 粘度系数（据MH公式手册查出键入） PolymerA 标准品的α，k 值。 PolymerB 样 品的α，k 值。 点击 OK 校准曲线立即得到修正。 如果查不到样品的粘度系数α， k 值，则不做该相修正。