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基因工程综合题 1．（14分,每空2分）嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：Ⅰ.利用大肠杆菌表达BglB酶（1）PCR扩增bglB基因时，选用????????基因组DNA作模板。（2）右图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入???????????和??????????不同限制酶的识别序列。（3）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为???????????????????????。Ⅱ.温度对BglB酶活性的影响（4）据图1、2可知，80℃保温30分钟后，BglB酶会?????????????；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在?????????????（单选）。A.50℃???? B.60℃?????C.70℃????? D.80℃Ⅲ.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性在PCR扩增bglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。（5）与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中????????????（多选）。A.仅针对bglB基因进行诱变???? B.bglB基因产生了定向突变C.bglB基因可快速累积突变???? D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变 2．I．(10分)周期性共济失调是一种由常染色体上的基因(用A或a表示)控制的遗传病，致病基因导致细胞膜上正常钙离子通道蛋白结构异常，从而使正常钙离子通道的数量不足，造成细胞功能异常。该致病基因纯合会导致胚胎致死。患者发病的分子机理如题8图所示．请回答：(1)图中①表示的生理过程是_______，如细胞的_______ (填结构)被破坏，会直接影响图中结构C的形成。(2)图中所揭示的基因控制性状的方式是_______。(3)一个患周期性共济失调的女性与正常男性结婚生了一个既患该病又患红绿色盲的孩子(色盲基因用b代表)。这对夫妇中，妻子的基因型是_______，这对夫妇再生一个只患一种病的孩子的概率是_______。II．(10分)试管婴儿技术是指采用人工方法将卵子与精子从人体内取出并在体外受精，发育成胚胎后，再移植回母体子宫内，以达到受孕目的的一种技术．(1)顺利受精必须满足两个条件：来自父方的精子要进行_________．来自母方的卵母细胞要_________。(2)_________(填生物技术)是培育试管婴儿最后一道工序。一般来说，该技术操作比较合适的时期是_________。(3)PCR技术可用于产前基因诊断，若消耗引物分子14个，则DNA扩增了_________轮。 3．若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因(1.2? kb)，并将之取代质粒pZHZ1(3.7? kb，1? kb＝1000对碱基)上相应的EF区域(0.2? kb)，形成重组质粒pZHZ2，请据图回答下列问题：图7－16－1(1)限制酶E和限制酶F在结构和功能上的不同之处分别在于①______________________；②______________________。(2)pZHZ2所含有的碱基对数为________kb。(3)将重组质粒pZHZ2导入至山羊的受精卵细胞中，若pZHZ2进入细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子山羊的方式是____________________。(4)上述目的基因模板链中的TGA序列对应一个密码子，翻译时识别该密码子的tRNA上相应的反密码子碱基序列是________。 4．英国纽卡斯尔大学约翰·伯恩教授领导的研宄小组已从人的皮肤细胞中提取出细胞核，然后将其植入几乎被完全剔除了遗传信息的牛卵细胞中，从而培育出人兽混合胚胎（如图所示）。该胚胎发育到第三天时已含有32个细胞，研究人员希望它能继续生长到六天，再从胚胎中取出干细胞供医学研究使用。(l)混合胚胎的基因组成有99%以上都是人类的，只有不到1%是牛的，这1%的牛基因位于_________。(2)核移植过程中用物理或化学方法如电脉冲、聚乙二醇等激活受体细胞，其目的是使其完成__________和发育进程。(3)从早期胚胎或原始性腺中分离出来的细胞，称为ES或EK细胞，这类细胞在功能上的特点是_________，但把ES细胞培养在__________细胞上能够维持不分化的状态。(4)如果想同时得到多头基因型相同的“重组