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不合理,缺少空白对照 接种环 烧后未冷却;②划线未从第一区域末端开始 ①接种环灼 目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质 尿素作为唯一 的氮源 纤维素作为唯一的碳源 在培养基中加入 酚红指示剂,若 指示剂变红,pH 升高,说明细菌 能分解尿素 刚果红染色法,即刚果红 与纤维素形成红色复合物, 当纤维素被分解后,培养 基出现以纤维素分解菌为 中心的透明圈 C * 第十二单元 生物技术实践 第十二单元 生物技术实践 营养物质 生长繁殖 碳源 氧气 液体 固体 称量 灭菌 接种 平板划线 稀释涂布平板 菌落 脲酶 催化 稀释涂布平板 培养基 刚果红染色法 是否 产生透明圈 ↓ ↓ ↓ ↓ 纤维素 纤维素酶 不加凝固剂 工业生产 加凝固剂(如琼脂) 微生物分离、鉴定, 活菌计数,菌种保藏 (2)按功能分类 种类 制备方法 原理 用途 举例 选择 培养基 鉴别 培养基 培养基中 加入某些 化学物质 依据某些微生 物对某些物质 的特殊需求或 抗性而设计 从众多微 生物中分 离所需的 微生物 加入青霉 素分离得 到酵母菌 和霉菌 培养基中 加入某种 指示剂或 化学药品 产生特定的颜 色或其他变化 鉴别不同种 类的微生物 用伊红—美 蓝培养基鉴 别大肠杆菌 较为温 和的物 理或化 学方法 仅杀死物体 表面或内部 的部分对人 体有害的微 生物 煮沸消毒法 日常用品 巴氏消毒法 不耐高温的 液体 化学药剂 消毒法 用酒精擦拭 双手,用氯 气消毒水源 强烈 的理 化因素 杀死物体 内外所有 的微生物, 包括芽孢 和孢子 灼烧灭菌法 接种工具 干热灭菌法 玻璃器皿、 金属工具 高压蒸汽 灭菌法 培养基及容 器的灭菌 3.纯化微生物的接种方法 项目 平板划线法 稀释涂布平板法 原理 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基上。在数次划线后培养,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,即菌落 将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落 可以观察菌落特征, 对混合菌进行分离 可以计数,可以观察菌落 特征 不能计数 吸收量较少,较麻烦, 平板不干燥效果不好, 容易蔓延 适用于好氧菌 适用于厌氧菌和兼性厌氧 菌 第一次操作 每次划线之前 划线结束 目的 杀死接 种环上 原有的 微生物 杀死上次划线后接种环上 残留的菌种,使下次划线 的菌种直接来源于上次划 线的末端,使每次划线菌 种数目减少 杀死接种环上 残存的菌种, 避免细菌污染 环境和感染操 作者 D B B 氮源和无机盐 只有能利用苯磺隆的微生 物能正常生长繁殖 细胞分裂素 母液 *
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