毛细管区带电泳要素.ppt

毛细管区带电泳 （capillary zone electrophoresis） 毛细管区带电泳的定义 区带电泳的分离原理 区带电泳的操作条件 毛细管区带电泳的应用 毛细管区带电泳的定义 ＊毛细管区带电泳（capillary zone electrophoresis）： 也称为毛细管区带电泳自由溶液电泳，是毛细管电泳最基本，应用最广泛的一种分离模式。 ＊毛细管区带电泳的分离依据： 基于试样组分质荷比的差异。 ＊毛细管区带电泳的分离对象： 特别适合分离带电化合物，包括无机阴离子、无机阳离子、有机酸、胺类化合物、氨基酸、蛋白质等，不能分离中性化合物。 毛细管区带电泳的分离原理 ＊溶质中具有不同质荷比的带电粒子在电渗流的作用下流出速度的差异，达到分离。 ＊溶质的流出顺序：阳离子中性粒子阴离子 ＊质荷比越大的粒子流出上网速度越快。 区带电泳的操作条件 ＊选择缓冲溶液的类型 ＊改变溶液的离子强度 ＊改变pH值 ＊加入添加剂 缓冲溶液的选择应遵循的要求： （1）在所选的pH范围内有合适的缓冲容量。 （2）本底的响应值低。 （3）自身的淌度要低，离子大而带电小。 硼酸盐、三羟甲基氨基甲烷等缓冲溶液，因缓冲容量大，背景干扰小，经常被作为缓冲溶液使用。 缓冲溶液的pH决定了弱电离试样的有效淌度，同时控制着电渗流的大小和方向，一般通过实验来优化最佳pH值。 缓冲溶液、离子强度、pH影响电渗流的大小和方向，决定区带电泳的柱效、选择性以及分离度和分离时间。 添加剂的种类及作用 1.中性盐 加入高浓度的中性盐，大量的阳离子争夺毛细管壁的负电荷从而降低管壁对蛋白质的吸附。 2.手性添加剂 手性冠醚、环糊精的加入可以实现对光学异构体的手性拆分。 3.添加高分子非电解物质 高分子添加剂的加入可以形成分子或者特殊的局部结构，从而影响分离过程，如纤维素、聚乙烯醇、多糖等。 4.表面活性剂 表面活性剂具有增溶，吸附形成胶束的功能。低浓度的阳离子表面活性剂，能在毛细管壁形成单层或者双层吸附，改变电渗流的大小甚至方向。必须说明的是，加入的表面活性剂的浓度必须小于其临界胶束浓度。 毛细管区带电泳的应用 区带电泳的应用与发展 ＊ 新技术的应用比如衍生化法使得区带电泳能分离的物质的范围得以拓展。 ＊ 区带电泳与其他仪器的连用能使得其定性定量可靠性提高。