大学毕业设计—棉花根际土壤中拮抗大丽轮枝菌芽孢菌筛选及鉴定.docVIP

2014届本科毕业论文(设计) 棉花根际土壤中拮抗大丽轮枝菌芽孢 菌筛选及鉴定 学 院：生命科学学院 专业班级：生物科学10-2班 学生姓名：毛云 指导教师：赵惠新 答辩日期：2014年5月17日 新疆师范大学教务处 目 录 1 引言 1 1.1 棉花黄萎病的分布和危害 1 1.2 生物防治的概念 1 1.3 枯草芽孢杆菌与黄萎病的关系 2 1.4 拮抗细菌的作用机制 2 1.5 棉花黄萎病生物防治存在的问题和展望 2 2 材料 4 3 方法 4 3.1 土壤中芽孢菌的分离纯化实验 4 3.2 拮抗实验 4 3.2.1 大丽轮枝菌的扩大培养 4 3.2.2 大丽轮枝菌拮抗芽孢菌的筛选 4 3.2.3 拮抗菌保存实验 5 3.2.4 芽孢菌的胞内胞外拮抗实验 5 3.3 菌株的革兰氏染色实验 5 3.4 拮抗菌的生理生化鉴定实验 5 3.4.1 淀粉水解的测定 5 3.4.2 明胶液化 5 3.5 分子鉴定实验 6 3.5.1 拮抗菌菌体的提取 6 3.5.2 拮抗菌的测序 6 3.5.3 拮抗菌的分析 6 4 实验结果与分析 7 4.1 土壤中芽孢菌的分离与纯化 7 4.2 棉花黄萎病拮抗菌的筛选 7 4.3 棉花黄萎病拮抗细菌的鉴定结果 10 4.3.1 菌落特点 10 4.3.2 革兰氏染色结果 11 4.3.3 拮抗菌的生理生化鉴定 11 4.3.4 拮抗菌分子坚定结果 11 5 鉴定结果 12 讨论 13 参考文献 14 附录 15 致谢 21 棉花根际土壤中拮抗大丽轮枝菌芽孢菌 筛选及鉴定 摘要：大丽轮枝菌(VerticilliumdahaliaeKleb )引起的的棉花黄萎病是棉花的主要病害，对棉花生产危害极大。该病为土传真菌病害，防治难度大，目前主要采取选育抗病品种为主的综合治理措施，但由于缺乏理想的高抗丰产品种和有效药剂，生物防治日益受到重视。为了寻找生防菌株资源，进而研制开发防治棉花黄萎病的新型生防制剂，本论文对棉花黄萎病菌拮抗微生物的筛选、鉴定及拮抗作用进行了研究。从连作棉田采集土样，经室内分离共获得细菌32株，经室内初步平皿对峙试验，发现其中有6株细菌菌株对大丽轮枝菌具有很强的抑制作用。参照常见细菌鉴定手册，对细菌菌株的形态特征观察，生理生化试验及16SrDNA鉴定，最终该菌株鉴定为短小芽孢杆菌。 关键词：棉花黄萎病；大丽轮枝菌；拮抗作用；生物防治 Cotton rhizosphere soil dahlia wheel branch bacteria antagonism spore bacteria screening and identification Abstract：By dahlia wheel branch bacteria (VerticilliumdahaliaeKleb) caused by Verticillium wilt of cotton is one of the main problems of the cotton, the great harm of cotton production. The disease for soil fungi disease,the prevention and control is very difficult,at present the main breeding disease-resistant varieties mainly comprehensive control measures,but because of the lack of ideal varieties of high fertility and effective drugs, Biological control is becoming more and more attention, In search of bio-control strain resources, further research and development of new bio-control agents, prevention and control of cotton verticillium wilt of cotton verticillium wilt fungus antagonist microbial this paper screening, identification and antagonism effect were studied. From cotton continuous cro