2实验二凝集、沉淀反应概述.pptVIP

实验二  凝集、沉淀反应 实验目的 1.熟悉凝集反应、沉淀反应的概念。 2.了解单向琼脂扩散实验的原理、方法及应用。 3.掌握直接凝集反应玻片法的原理、方法及其用途。 4.掌握双向琼脂扩散实验的原理、方法、结果判断。 实验原理 1.直接凝集反应：颗粒性抗原与相应抗体结合后所呈现的肉眼可见的凝集现象。 。 2.沉淀反应：可溶性抗原与相应抗体在适当条件下结合而出现的沉淀现象。 实验材料 伤寒杆菌诊断血清、伤寒杆菌菌液、生理盐水、 载玻片、接种环、记号笔、酒精灯；琼脂板、打孔器、针头、毛细滴管、待测血清、 AFP阳性血清、AFP诊断血清（兔抗人AFP ）等。 抗原抗体反应又称血清学反应，主要有： 1、凝集反应 2、沉淀反应 3、补体参与反应 4、中和反应 5、免疫标记技术 操作步骤 取洁净玻片1张，用蜡笔划分2等份，如下图所示 ； 无菌操作，用接种环分别于一、二格内各加2～3环伤寒杆菌诊断血清、生理盐水； 用接种环取待测菌液，分别涂布于生理盐水和伤寒血清中，混匀； 轻轻摇动玻片，1~2分钟后观察结果。 盐水侧无凝集颗粒； 血清侧出现肉眼可见的凝集块为阳性，仍为均匀一致乳浊液者为阴性。 （一）单向琼脂扩散试验 （示教） 原理: 适宜浓度的抗体预先在琼脂中混匀后制成琼脂板，以适当距离打孔，将可溶性抗原至孔中，抗原向周围