8-真核生物的表达调控课件.pptVIP

信号转导对转录因子活性的影响 cAMP response element CRE –binding protein 三. 转录后水平的调控 mRNA的选择性剪接 (1)内含子和外显子的选择 (2)转录终止信号的选择 ２. mRNA 运输的控制 3. 转录后的基因沉默（RNA干涉） Posttranscriptional gene silencing (PTGS) = RNA interference(RNAi) mRNA的选择性剪接 (1)内含子和外选子的选择 mRNA的选择性剪接 (2) 转录终止信号的选择 RNAi （RNA干扰） 1.线虫、昆虫、哺乳动物、植物和真菌 2.机制：dsRNA诱导产生的细胞内同源基因表达阻断 3.生物学功能：细胞内免疫，阻止外源病毒和核酸的入侵，阻断逆转作子的作用。 4.应用: 反相遗传工具， 研究基因功能 基因治疗 四.翻译水平的调控 1. 翻译起始的调控 2. mRNA稳定性调节 3. 小分子RNA对翻译水平的影响 1. 翻译起始的调控 (1) 未受精卵, 隐蔽mRNA (masked mRNA)；受精：招募因子(recruitment factor)，激活隐蔽mRNA (2) 阻遏蛋白的调控：铁结合调节蛋白 (3) 翻译起始因子的调控：eIF-2磷酸化对活性的调节 (4) 5′AUG对翻译的调控作用：减少正常AUG启动翻译的作用，使翻译维持在较低水平 (5) mRNA5 ′端非编码区长度对翻译的影响 3′ 3′ 铁结合调节蛋白 翻译起始因子(eIF2)的调控 2. mRNA稳定性调节 3′端非编码区结构影响其稳定性：重复AUUUA序列，引起mRNA 不稳定; 蛋白因子的结合可改变mRNA的半衰期. 3.小分子RNA对翻译水平的影响(反义RNA) 五.翻译后水平的调控 新生肽链的水解, 酶解. (1)前体的加工 (2)半衰期:肽链N端第一个氨基酸严重影响蛋白的半衰期 肽链中氨基酸的可逆共价修饰： 磷酸化*、甲基化、酰基化 通过信号肽分拣、运输、定位 其它:酶活性的别构调节等 八.基因的表达与调控(下) 真核基因表达调控的一般规律 基本概念: 1. 顺式作用元件 (cis-acting element) (1) 影响自身基因表达活性的DNA序列 (2) 非编码序列 (3) 包括启动子、增强子、沉默子 增强子(沉默子)特点 无方向, 位置, 距离的限制; 具有组织、细胞特异性, 无基因特异性; 有时两者可相互转换（与结合的反式作用因子有关） 不属于启动子,　能调节基因的转录； 增强子之间同源性较低，但存在一个共同的核心保守序列 5’ GTGAAG 3’。 2. 反式作用因子(trans-acting factor)-转录因子 (1) 概念：为DNA结合蛋白，核内蛋白，可使邻近基因开放（正调控）或关闭（负调控） (2) 通用或基本转录因子(general transcription factors)—RNA聚合酶结合启动子所必需的一组蛋白因子。 TFⅡA、 TFⅡB、 TFⅡD、 TFⅡE等 (3) 特异转录因子( special transcription factors)—个别基因转录所必需的转录因子. OCT-2：在淋巴细胞中特异性表达，识别Ig基因的启动子和增强子。 (4) 反式作用因子特点 三个功能结构域： (1) DNA识别结合域； (2) 转录活性域; (3)* 结合其他因子或蛋白的结合域. 能识别并结合顺式作用元件 正调控与负调控 顺式作用元件 和 反式作用因子的相互作用, 及与基因表达的关系 功能结构域 反式作用因子结构域的模式 DNA结合域 转录活化结构域 (1) 酸性α-螺旋结构域 (2) 富含谷氨酰胺结构域 (3) 富含脯氨酸结构域 (1) 锌指结构 (2) 螺旋-转角-螺旋(HTH) (3) 亮氨酸拉链 (4) 螺旋-环-螺旋(HLH) (5) 碱性α螺旋 锌指结构(zinc finger motif) C2H2 zinc finger R R R H DNA binding Zinc fingers 螺旋-转角-螺旋(helix-turn-helix) 亮氨酸拉链(leucine zipper) 螺旋-环-螺旋(helix-loop-helix,HLH)  真核生物基因多层次表达调控 一. DNA水平的调控* 二. 转录水平的调控----最重要 三. 转录后水平的调控* 四. 翻译水平的调控 五. 翻译后水平的调控* 一. DNA水平的调控 (1) 染色质的丢失