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small RNA 目录 small RNA定义：小分子RNA是一类长约20～30个核苷酸的非编码RNA分子，是一大类调控分子，几乎存在于所有的生物体中。参与基因表达与调控、RNA的加工与剪切、蛋白质翻译、遗传“入侵”抑制、配子发生等重要生物学过程，是生命活动中必不可少的调控因子。 小分子RNA分类 siRNA RNA干扰（RNA interference,RNAi):生物体内通过双链RNA分子在mRNA水平上诱导具有特异序列的基因沉默的过程。统一将介导这种沉默的小片段RNA称为干扰小RNA（Small interfering RNA ，siRNA) siRNA：是一种小RNA分子（21-23nt），由Dicer（RNAase Ⅲ家族中对双链RNA具有特异性的酶）加工而成。 病毒基因、人工转入基因、转座子等外源性基因随机整合到宿主细胞基因组内，并利用宿主细胞进行转录时，常产生一些dsRNA。宿主细胞对这些dsRNA迅即产生反应，其胞质中的核酸内切酶Dicer将dsRNA切割成多个具有特定长度和结构的小片段RNA（大约21～23 bp），即siRNA。siRNA在细胞内RNA解旋酶的作用下解链成正义链和反义链，继之由反义siRNA再与体内一些酶（包括内切酶、外切酶、解旋酶等）结合形成RNA诱导的沉默复合物（RNA-induced silencing complex，RISC)。RISC与外源性基因表达的mRNA的同源区进行特异性结合，RISC具有核酸酶的功能，在结合部位切割mRNA，切割位点即是与siRNA中反义链互补结合的两端。被切割后的断裂mRNA随即降解，从而诱发宿主细胞针对这些mRNA的降解反应。siRNA不仅能引导RISC切割同源单链mRNA，而且可作为引物与靶RNA结合并在RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase，RdRP）作用下合成更多新的dsRNA，新合成的dsRNA再由Dicer切割产生大量的次级siRNA，从而使RNAi的作用进一步放大，最终将靶mRNA完全降解。 miRNA microRNA(miRNA):又称微小RNA，是在真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码RNA，其大小长约20~25个核苷酸。成熟的miRNAs是由较长的初级转录物经过一系列核酸酶的剪切加工而产生的，随后组装进RNA诱导的沉默复合体（RNA-induced silencing complex,RISC），通过碱基互补配对的方式识别靶mRNA，并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻译。 piRNA piRNA（Piwi-interactingRNA）是从哺乳动物生殖细胞中分离得到的一类长度约为30nt的小RNA，并且这种小RNA与PIWI蛋白家族成员相结合才能发挥它的调控作用。目前，越来越多的文献表明piRNA在生殖细胞的生长发育中的调控是由于Piwi-piRNA复合物引起的基因沉默导致的，但由于对piRNA的研究尚处于初级阶段，它的一些具体的功能和生源论尚在研究当中。有关piRNA的研究成果主要来自于美国、英国和日本，尚未见国内实验室的有关研究报道。 小分子RNA的应用 　研究基因功能的重要工具 　研究细胞发育和分化 　研究疾病的发生机制 　疾病治疗的工具 最有应用前景的应该是治疗病毒性疾病和肿瘤 展望 近年来, 全球对小分子RNA 的研究已经从 siRNA介导的RNAi 发展到当前的miRNA , 从单纯的基因功能分析扩展到细胞发育、生物进化、肿瘤发生、疾病诊治和抗病毒感染等。我们完全有理由相信,小分子RNA 将在生命科学领域发挥更大的作用,为人类的健康带来更多的佳音。 * 小分子RNA定义 小分子RNA分类 小分子RNA的应用 展望 small RNA piRNA miRNA others siRNA 1.Dicer切割dsRNA 2.siRNA解旋 3.反义siRNA与酶结合形成RISC 4.RISC与mRNA结合，切割mRNA 5.被切割后的断裂mRNA随即降解 1.长约75bp的茎环结构前体RNA被Dicer RNase酶切 2.与沉默复合体（RISC）结合 3.成熟的miRNA结合到与其互补的mRNA的位点 4.与靶mRNA不完全互补的miRNA在蛋白质翻译水平上抑制其表达（哺乳动物中比较普遍）。如果miRNA与靶位点完全互补（或者几乎完全互补），那么这些miRNA的结合往往引起靶mRNA的降解(在植物中比较常见)。 siRNA和miRNA的比较 *