干细胞组织工程综合课件2.ppt

干细胞与组织工程 生物治疗国家重点实验室 干细胞与组织工程研究室 杨志明 普及干细胞、组织工程基础知识 介绍干细胞、组织工程研究进展 促进干细胞、组织工程研究开发 吸收更多的科学工作者投入研究 开课目的 理论讲授 39h 见习操作 16h 座谈讨论 1h 考核方式 写综述 课程进行方式 自体组织移植 同种异体组织移植 人工材料植入 异种组织移植 组织工程学及提出的背景 1、组织缺损的修复 药物治疗 人工器官 器官移植 基因治疗 细胞治疗 2、器官功能衰竭的治疗 组织工程的定义 应用生命科学与工程学的原理、技术、方法， 在体外构建一个有生命的种植体 修复组织缺损、替代器官一部分或全部功能 达到提高生活质量、生存质量目的 组织工程的内函 修复组织缺损，重建器官功能 组织工程是多种高科技技术的有机结合 自体细胞 同种异体细胞 组织源细胞 成体干细胞 胚胎干细胞 组织工程的种子细胞 胚胎 成人 导入功能基因 BMP、VEGF 永生化 SV40大T抗原 ptsA58H质粒 提高端粒酶活性 pGRN145质粒 细胞的基因改造 生物反应器 细胞因子 扩增细胞的安全性 细胞的扩增 高分子合成材料 PLA、PGA、PLGA、Plurolic 陶瓷材料 HAP、β-TCP、CPCP、BGC 天然材料 HA Callegen 甲壳素 珊瑚 复合材料 脱细胞材料 骨、肌腱、真皮、膀胱、软骨 支架材料 scafford material 生物相容性 可降解性（可控） 引导或诱导组织再生 适于细胞粘附、生长、代谢 一定的生物力学强度 一定的形态 理想的支架材料 BMP促进成骨 VEGF、PDGF促进血管化 IGF、bFGF促进分化 NGF促进神经再生 生物活性因子 四环素 辛法他汀 苯妥因 具有生物活性因子作用的药物 结构组织组织工程的主要进展 骨 软骨 肌腱 周围神经 骨骼肌 骨 组 织 工 程 研 究 不同来源成骨细胞的优选及建立标准细胞系 ＃ 骨膜（ 膜OB） ＃ 骨皮质 ＃ 骨松质（松OB）  ＃ 骨髓（MSC）  ＃ 骨外组织 具有成骨功能的细胞 种子细胞研究 三种来源的成骨细胞作为组织工程 种子细胞均不能满足要求 MSC增殖能力强，但成骨能力差 POB成骨能力强，但增殖能力较弱 解决途径：细胞改造 用HA/β-TCP，BGC制成微孔或多孔管状人工骨 ※ HA/β-TCP: 成份Ca5 (PO4)3OH/Ca3(PO4)2,多孔结构，孔隙率70%，孔径150~450um，平均300um HA相:65%，β-TCP相:35% 在体液环境下易溶解，局部释放HA晶粒，不形成水凝胶层 支架材料研究 复合管状支架的制备 ▲ 加压离心灌注法将PDLLA与BGC和HA/β-TCP按1∶50复合，制成中空微孔复合BGC管状材料和中空多孔复合HA/β-TCP管状材料 ▲ 将复合管状材料与rhBMP-2 复合后，再与Ⅰ型胶原复合，形成含 rhBMP-2和胶原的中空微孔（或多孔）管状支架材料 组织工程化骨的营养来源：血管化问题 带血管蒂组织移植 生长因子 血管内皮细胞复合培养 肌 腱 组 织 工 程 研 究  贴壁时间 延展时间 胶原类型 原代 26h 36h  传代 4h 8h  原代 48h 60h  传代 8h 18h 腱外膜细胞与腱细胞的区别 Ⅰ、Ⅲ Ⅰ 腱外膜细胞 腱细胞 IGF-1促腱细胞生长的量效关系（cpm) 0 1.25 2.5 5.0 10.0 20.0 40.0 原代 0.44 0.62 0.94 1.26 1.49 1.78 2.16 N6 0.48 0.65 0.93 1.24 1.45 1.82 2.14 IGF-1浓度（μg/L) IGF-1促腱细胞生长及其调控 具有同类细胞的所有功能特性 增殖能力强 可在体外长期连续传代 建立组织工程化标准细胞系 分子生物学技术 组织工