学位论文--三氯乙烯药疹样皮炎细胞免疫学指标及发病机制研究.docVIP

目 录 中文摘要 1 英文摘要 6 英文缩写词表 12 前 言 14 第一部分 TCE药疹样皮炎细胞免疫学指标及发病机制研究 19 第一节 TCE药疹样皮炎患者外周血淋巴细胞抗原特异性增殖功能测定 21 第二节 TCE药疹样皮炎患者外周血免疫细胞检测分析 26 第三节 Fas/FasL与PF/GrB介导的TCE免疫毒作用机制探讨 37 小 结 55 第二部分 8例TCE药疹样皮炎患者病例报告分析 56 小 结 71 总 结 72 致 谢 74 参考文献 76 附录1 生物标志物的验证及其在健康危险预警中的作用 86 附录2 个人简历 96 三氯乙烯药疹样皮炎细胞免疫学指标及发病机制研究 中文摘要 职业接触三氯乙烯（Trichloroethylene，TCE）引起的TCE药疹样皮炎是近年来我国职业卫生领域令人关注的问题，但目前关于该病的发病机制尚不清楚，对TCE职业接触工人缺乏特异性健康监护指标，对TCE药疹样皮炎患者缺乏特异性临床治疗措施。 根据该病的发病特点一般认为其属于Ⅳ型超敏反应的可能性最大，Ⅳ型超敏反应发生的机制与抗体和补体无关，主要是T细胞介导的免疫损伤。T细胞介导的免疫反应发生的过程涉及到记忆性T淋巴细胞的生成和效应性T细胞的活化增殖，效应性T细胞通过分泌一系列细胞因子发挥作用，并调节B细胞、NK细胞以及其他各群免疫细胞的活化增殖。另外，细胞毒性T细胞（CTL）在T细胞介导的超敏反应中发挥重要的作用，其主要通过两条途径杀伤靶细胞，其一是穿孔素-颗粒酶途径，其主要参与免疫防御；其二是Fas-FasL途径，Fas/FasL主要介导活化的效应性细胞凋亡，清除激活的外周CTL，下调免疫应答。这两条途径对于机体对外来抗原进行适度的免疫应答，维持免疫自稳发挥重要作用。正常状态下，特异性淋巴细胞在外周免疫器官接受抗原刺激而大量增殖，在免疫应答末期，机体通过Fas/FasL细胞凋亡机制使发生活化的T细胞凋亡，从而对免疫过程进行严密调控，以维持免疫自稳。因此，TCE药疹样皮炎的的发生可能是由于机体免疫自稳状态被打破，发生过强的免疫应答反应所致。 为验证上述假说，本研究采用成组设计的多个样本比较分析以及TCE药疹样皮炎患者入院治疗以及肝功能恢复正常时机体细胞免疫学指标的比较分析，进一步探讨机体细胞免疫学指标的变化与TCE药疹样皮炎的关系。研究结果如下： 一、TCE药疹样皮炎细胞免疫学指标及发病机制研究 本研究选择三组研究对象，病例组为16例TCE药疹样皮炎患者。接触对照组为32例来自与病例同车间的从事TCE作业的健康职业工人；非接触对照组为28例从未接触过TCE及其他职业性有害因素的的健康就业前体检工人。三组研究对象按年龄性别进行匹配后，结果如下： 1.淋巴细胞抗原特异性增殖功能 16例病人除皮疹外，还伴有不同程度的肝损害，谷丙转氨酶（ALT）水平升高者15例（93.33%）；谷草转氨酶（AST）升高者12例（73.33%）。三组研究对象外周血淋巴细胞分别与不同浓度TCE（0.2mmol/L、1 mmol/L、5 mmol/L）共培养，在各组内随着TCE染毒浓度的增加外周血淋巴细胞的存活率逐渐降低，差异有统计学意义(p0.05)，相同染毒浓度下淋巴细胞的存活率组间差异无统计学意义(p0.05)，提示TCE本身具有细胞毒性，而在TCE药疹样皮炎患者以及TCE接触对照体内并不存在针对TCE原形的特异性记忆性淋巴细胞。 2.外周血淋巴细胞亚群分析 研究对象血常规检测结果发现，16例病人中有6例（37.5%）病人外周血淋巴细胞（LYMP）高于临床正常参考值范围，1（6.25%）例低于临床正常参考值范围；6例（37.5%）单核细胞（MONO）高于临床正常参考值范围；14例（87.5%）中性粒细胞（NEUT）高于临床正常参考值范围；8例（50%）嗜酸性粒细胞（EO）高于临床正常参考值范围，2例（12.5%）低于临床正常参考值范围，8例（50%）嗜碱性粒细胞（BASO）高于临床正常参考值范围。在接触对照组和非接触对照组体内上述指标均在临床正常参考值范围内。提示TCE药疹样皮炎患者体内免疫细胞的数量发生异常，由于外周血免疫细胞的改变与组织内免疫细胞的浸润密切相关，尤其是嗜酸性粒细胞主要分布于人体内呼吸道、消化道和泌尿生殖道粘膜组织中，其水平的升高可能与TCE药疹样皮炎病人出现的眼、口、生殖器等处的粘膜损伤有关。 结合血常规与流式细胞术检测的结果，比较各组之间淋巴细胞亚群在外周血中的变化情况。结果发现病例组外周血淋巴细胞总数、T细胞、CD4+T细胞计数均明显高于接触对照组和非接触对照组(p0.05)，在接触对照组和非接触对照组之间无统计学差异(p0.05)，提示这三个指标可作为TCE药疹样