4789.11溶血性链球菌全解.pptVIP

本标准与GB/T 4789.5-2003相比主要变化 —— 删除了以无菌生理盐水稀释样品的步骤； —— 增菌培养基以改良胰蛋白胨大豆肉汤代替了葡萄糖肉浸液肉汤和匹克氏肉汤； —— 分离培养基以哥伦比亚CNA血琼脂和哥伦比亚血琼脂代替了血琼脂平板； —— 完善了操作步骤； —— 在人血浆的基础上增加了兔血浆和绵羊血浆； —— 增加了规范性附录A。 溶血性链球菌检验程序 操作步骤 1样品处理及增菌 按无菌操作称取检样25 g（或mL），加入盛有225 mL mTSB的均质袋中，用拍击式均质器均质1 min～2 min；或加入盛有225 mL mTSB的均质杯中，以8000 r/min～10000 r/min均质1 min～2 min。若样品为液态，振荡均匀即可。36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h。 2 分离 将增菌液划线接种于哥伦比亚CNA血琼脂平板，36 ℃±1 ℃厌氧培养18 h～24 h，观察菌落形态。 溶血性链球菌在哥伦比亚CNA血琼脂平板上的典型菌落形态为灰白色、半透明、光滑、表面突起、圆形、边缘整齐，并产生β型溶血。 3 鉴定 3.1 分纯培养 挑取可疑菌落分别接种哥伦比亚血琼脂平板和接种TSB增菌液， 36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h。 3.2 革兰氏染色镜检 挑取可疑菌落染色镜检。β型溶血性链球菌为革兰氏染色阳性，球形或卵圆形，常排列成短链状。