抗缪勒氏管激素AMH生殖内分泌方面的临床检测应用..doc

关于抗缪勒氏管激素（AMH） 抗缪勒氏管激素（anti-Mullerian hormone，AMH）是转化生长因子β 超家族的成员之一，由Professor Alfred Jost首先发现。AMH是由两个相同的70×103Da亚基，通过二硫键连接组成的二聚糖蛋白，相对分子质量为140×103Da；人类AMH编码基因位于19号染色体短臂，大小2.4～2.8kb，含有5个外显子。抗缪勒氏管激素（AMH）在性腺器官发育过程中起着重要作用，是男女性腺功能的重要标记物之一。在男性AMH主要由睾丸间质细胞产生，始于胚胎形成并贯穿生命始终；在男性胎儿的发育过程中，AMH导致缪勒氏管退化，形成正常发育的男性生殖管道。在女性AMH主要由卵巢颗粒细胞产生，血清AMH保持相对于男性较低的一个水平，从青春期开始，血清AMH水平随时间慢慢降低，并在更年期降低到ELISA法检测不到的水平。 抗缪勒氏管激素主要应用领域： （1）卵巢储备功能的评价 （2）多囊卵巢综合症（PCOS） （3）辅助生殖技术（ART）中的预测 （4）卵巢早衰 （5）隐睾症 （6）青春期性早熟 检验原理： 试剂盒采用三步夹心酶联免疫法定量检测：在第一步，将标准品、质控品和样本加入到包被了抗体的微孔中并孵育。在第一次孵育和洗涤之后，微孔中加入生物素标记的抗体并进行孵育。在第二次孵育和洗涤之后，微孔中加入链霉亲和素-辣根过氧化物酶结合物（SHRP）进行孵育。在第三次孵育并且清洗之后，加入显色液（TMB）进行孵育，随后加入酸性终止液结束反应。理论上，抗体-生物素结合物与固相抗体-抗原复合物结合之后，再与链霉亲和素-辣根过氧化物酶结合物结合。这样抗体-抗原-抗体生物素复合物-SHRP结合在微孔上，通过酶-底物反应检测。酶和底物反应程度由主波长为450nm，参考波长为630nm的双波长来测定，测得的吸光度反应了样品与校准品中被检测物的浓度，且成正相关，通过建立对数-对数标准曲线方程，求得待测样本的激素的浓度。  产品参数: 产品名 抗缪勒氏管激素（AMH）ELISA定量检测试剂盒 方法 定量三步夹心免疫分析法 孵育时间 90/30/30 检测范围 0.06-18ng/ml 样本量 25μL 样本类型 血清 储存条件 2-8℃，避光保存 有效期 18个月 交叉反应 无 精密度 批内变异系数（CV）≤10% 批间变异系数（CV）≤15% 干扰性 两倍生理浓度的血红蛋白、甘油三酯、胆红素的干扰性在±10%以内 特点介绍 独有的人源AMH特异性：只针对人源及灵长类AMH具有特异性，优化了检测特异性。 重组的人源AMH校准品：4个冻融周期保持稳定，预设浓度的校准品，避免由系列稀释引起的潜在误差 检测范围宽（0.06-18ng/ml）：避免样本重复试验。 三步夹心酶联免疫法：方法操作简单，适用于多数自动化平台。 长达18个月有效期：保证检测结果的一致性和保持高精密度。 ?6. 结果判读便捷：可使用各类计算软件进行结果的定量分析。 验证实验： 迈康准TMAMH检测试剂与某品牌试剂90个样本检测结果比较  分析性能评估指标： 1检测限： 三批成品试剂盒对1份检测限参考品复孔检测（n=20），严格按照产品使用说明书进行操作，分析统计检测结果，计算20次重复检测结果A值平均值M和标准差SD，以M+2SD计算浓度值，本试剂的检测限评价如下，检测限不高于0.06ng/mL： 1 2 3 M SD 检测限 M SD 检测限 M SD 检测限 0.0549 0.0028 0.04ng/mL 0.0506 0.0030 0.03 ng/mL 0.0472 0.0032 0.03 ng/mL 2 线性： 三批成品试剂盒对6份线性参考品（L1-L6）进行复孔检测（n=2），严格按照产品使用说明书进行操作，分析统计检测结果，试剂盒测量系统的线性评价如下： 样本 稀释倍数 1 2 3 检测结果(ng/ml) 相关系数r 检测结果(ng/ml) 相关系数r 检测结果(ng/ml) 相关系数r L1 1 13.45 0.9990 13.53 0.9980 13.36 0.9980 L2 1/2 6.70 6.63 6.42 L3 1/6 2.20 2.21 2.17 L4 1/18 0.69 0.72 0.74 L5 1/72 0.18 0.17 0.15 L6 1/288 0.04 0.04 0.05 3准确度 三批成品试剂盒对2份准确度参考品（A1、A2）进行复