淀粉酶及可溶性糖的测定.docxVIP

水稻种子萌发后淀粉酶活力的测定【实验原理】种子中贮藏的糖类主要以淀粉的形式存在。淀粉酶能使淀粉酶分解为麦芽糖：2（C6H10O5）n+nH2O nC12H22O11淀粉 麦芽糖麦芽糖有还原性，能使3,5-二硝基水杨酸还原成棕色的3-氨基-5-硝基水杨酸：产物3-氨基-5硝基水杨酸呈棕色，可用分光光度计测定。休眠种子的淀粉酶活力很弱，种子吸账萌动后，酶活力逐渐增强，并随着发芽天数的增长而增加。【仪器、材料与试剂】仪器分光光度计、离心机、恒温箱、恒温水浴锅、25mL刻度试管、乳钵、离心管材料水稻种子、芽糖、淀粉、3,5-二硝基水杨酸、酒石酸钾钠、细砂、磷酸二氢钾（KH2PO4）、磷酸氢二钠（Na2HPO4）、氯化钠（NaCl）、氢氧化钠（NaOH）试剂1.1g/L标准麦芽糖溶液 20mL精确称量100mg麦芽糖，用少量水溶解后，移入100mL量瓶中，用蒸馏水定容。2.0.02mol/L磷酸盐缓冲液（pH6.9） 100mL0.2mol/L磷酸二氢钾67.5mL与0.02mol/L磷酸氢二钾82.5mL混合，稀释10倍。3.10g/L淀粉溶液