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第一步: 第二步: 获取目的基因 目的基因与运载体结合 注意:要用同一种限制酶切取目的基因和运载体,并用DNA连接酶连接。 提醒:限制酶在第一步和第二步操作中都用到,且要求是同一种酶,目的是产生相同的黏性末端;第二步中两种工具酶都用到。 第三步: 第四步: 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测和表达 1、常用的受体细胞: 大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌、动植物细胞等 2、常用微生物作受体细胞的原因: 微生物增殖快、代谢快、目的产物多 一般检测: 标记基因是否表达 导入 接种培养 接种培养 接种培养 含有四环素的完全培养基 完全培养基 大肠杆菌不含抗四环素基因 证明: 不存活 含有四环素的完全培养基 证明: 大肠杆菌的受体细胞含有目的基因 四环素抗性基因 四环素抗性基因 存活 如何把导入了目的基因的受体细胞筛选出来? 存活 1 2 基因工程的操作工具 1.基因的剪刀 ——限制性内切酶 2.基因的针线 ——DNA连接酶 3.基因的运输工具 ——运载体 基因工程的操作步骤 1.目的基因的提取 2.目的基因与运载体结合 3.目的基因导入受体细胞 4.目的基因的检测与表达 基因工程(gene engineering)的原理 1.基因工程的概念 基因工程又叫_______________或DNA重组技术,即按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,______________,然后放到另一种生物的细胞里,___________生物的遗传性状。 2.基因工程的原理: 。 3.操作水平: 。 4.结果: 。 基因拼接技术 加以修饰改造 定向地改造 基因重组 DNA分子水平 定向地改造生物的遗传性状,获得人类所需要的品种。 5.基因操作的基本工具 (1)基因的“剪刀”:指_________________,简称限制酶。 ①分布:主要在____________ ②特性:一种限制酶只能识别一种特定的___________,并在特 定的切点上切割DNA分子。 (2)基因的“针线”:指__________,连接磷酸和脱氧核糖形成 ____________。 (3)基因的“运输工具”:即________。 实例:______、噬菌体、动植物病毒。 限制性核酸内切酶 原核生物体内 核苷酸序列 DNA连接酶 磷酸二酯键 运载体 质粒 1、基因工程与作物育种 生长快、肉质好的转基因鱼(中国) 乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷) 生长快、肉质好的转基因鱼(中国) 乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷) 转黄瓜抗青枯病基因的甜椒 转鱼抗寒基因的番茄 获得高产、稳产和具有优良品质的农作物和具有抗逆性的作物新品种。 2、基因工程与药物研制 我国生产的部分基因工程疫苗和药物 许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限,其价格往往十分昂贵。 微生物生长迅速,容易控制,适于大规模工业化生产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内,让它们产生相应的药物,不但能解决产量问题,还能大大降低生产成本。 胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取,100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素,其产量之低和价格之高可想而知。 将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌,每2000L培养液就能产生100g胰岛素!使其价格降低了30%-50%! 3、 环境保护 基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。 通常一种细菌只能分解石油中的一种烃类,用基因工程培育成功的“超级细菌”却能分解石油中的多种烃类化合物。有的还能吞食转化汞、镉等重金属,分解DDT等毒害物质。 利用基因工程培育的“指示生物”能十分灵敏地反映环境污染的情况,却不易因环境污染而大量死亡,甚至还可以吸收和转化污染物。 转基因食品 安全吗?! * * * * * * * * * * 基因工程及其应用 第2节 能发光的水母 能否能否让热带鱼也能发光? 设想 不能发光的热带斑马鱼 能产生人胰岛素的大肠杆菌 T T T T A G C C G G A A 又称基因拼接技术,或重组DNA 技术。 通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向的改造生物的遗传性状。 ? 基因工程(gene engineering) 原 理:
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