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- 2017-01-06 发布于北京
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[ELISA试验技术要点
酶联免疫吸附试验
(Enzyme-Linked Immunoabsorbent Assay,ELISA)
一、基本原理:
利用标记技术将酶标记到抗体(抗原)上,使待检物中相应的抗原(抗体)与酶标记抗体(抗原)发生特异性反应。在遇到相应的酶底物时,酶能高效、专一催化、分解底物,生成有颜色的产物。根据颜色的深、浅,可以判断待检物中有无特异的抗原(抗体)以及量的大小。该方法可对待测样品进行定性和定量分析,同时具有微量、特异、高效、经济、简便等优点,因此是一种广泛应用于生物和医学领域的微量测定技术。
目前使用的酶联免疫检测方法很多,应用较多的有:
间接法——用于测定抗体
双抗体夹心法——主要用于测定大分子抗原
竞争抑制法——主要用于测定小分子抗原
二、试验材料及试剂
酶标板(聚苯乙烯微量96孔板)
包被液(0.05M pH9.6 碳酸盐冲液)
无水Na2CO3 1.59g
NaHCO3 2.93g
蒸馏水定容至1000ml
洗涤液(0.1M pH7.4 磷酸盐缓冲液)
NaCl 8.0g
KCL 0.2
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