（精）细胞的传代培养.pptVIP

细胞的传代培养 本次课内容 复习细胞原代培养基本知识 细胞生长的规律 重点：细胞传代培养的操作过程 操作：HepG-2细胞的传代 原代培养 什么是原代培养？主要分哪几种类型？ 胰酶消化法的主要操作过程。 消化培养法的主要过程 细胞传代培养 概念：培养的细胞由于细胞增殖，数量增加，细胞难以继续生长繁殖，需要进行分瓶培养，将培养的细胞分散，以1:2或l:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养，也叫做继代培养 一般细胞可传代10-50代。 所谓细胞“一代”，即从细胞接种到分离再培养的一段时间。如某一细胞系为50代即该细胞已传代50次。 （一）潜伏期（Latent phase）： 细胞从接种到贴壁生长繁殖的一段时间。 二倍体细胞该期时间长（24-96h） 连续细胞系时间短（10-30min） （二）指数生长期： 细胞增殖最旺盛时期，一般用细胞分裂指数（Mitotic index，MI）表示，即细胞群中每1000个细胞中的分裂相数。 体外培养细胞分裂指数介于0.1-0.5%，且受细胞种类培养液成分、pH、温度等影响。 指数生长期是细胞活力最好的时期，可对细胞进行各种实验 指数生长期持续3-5d后，随细胞数量不断增多，生长空间日趋减少，细胞相互接触汇合成片，呈现接触抑制。而恶性细胞则无接触抑制现象。 癌细胞则由于营养成分的消耗和细胞代谢产