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- 2017-01-07 发布于湖北
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细胞移植示踪技术 细胞移植替代疗法是现代医学中发展最为迅速的领域之一 移植细胞的示踪方法 1.利用荧光染料标记细胞 2.改变细胞基因,使其表达特异性的标志物 3.选用雄性供体和雌性宿主,利用Y染色体作为标记物 4.用胸腺嘧啶类似物来标记分裂细胞 5.采用超顺磁氧化铁作为磁共振对比剂活体示踪移植细胞 荧光染料标记示踪技术 荧光染料标记示踪技术是利用荧光染料标记细胞,通过荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪等仪器检测,达到定位、示踪和定量等目的 荧光色素主要有烟酸己可碱。3’-四甲基-吲哚-羧花青-高氯酸盐、二脒基苯基吲哚等 不足之处:随着荧光衰减和细胞分裂而标记强度下降,不适宜检测1~2 个月以上的细胞,需离体状态下进行病理学切片分析 改变细胞基因,使其表达特异性的标志物 绿色荧光蛋白、荧光素酶、碱性磷酸酶、新霉素磷酸转移酶等。 将目的基因导人标记细胞内并维持其生物学功能。使其表达特异性的标志物,荧光分子来作为生物体的标记。 利用Y染色体作为标记物 最大优点标记技术简单,而标记效率很高,利用FISH技术细胞进行观察. Y染色体标记的局限性是只能在雄性供体和雌性宿主之间标记,不能进行自体细胞的标记示踪研究 用胸腺嘧啶类似物来标记分裂细胞 利用5-溴脱氧尿嘧啶核苷、氚胸腺嘧啶核苷能竞争竞争性地参与细胞DNA 合成,从而达到标记分裂细胞的目的。 标记物具有放射性,易造成放射污染 磁共
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