生化(核酸的生物合成)要点.ppt

第十章 核酸的生物合成 第一节 DNA的生物合成 一 DNA的半保留复制 1 概念： 2 实验证实(自学) 二 DNA复制的起始点和方向 1 起始点：原核生物一个，真核生物多个 2 方向： 双向等速 三 原核细胞DNA的复制（DNA指导下的DNA合成） 亲代 子代 （一）DNA复制酶学 1 DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ A dNTP齐备(原料) B 具引物(DNA或RNA) C 具模板(单链DNA) 三种DNA聚合酶比较 DNA聚合酶Ⅲ (主要) 负责DNA链的延伸,单链模板方向3’→5 ’ 链延伸方向5’→3 ’ DNA聚合酶Ⅱ 功能尚不清 DNA聚合酶Ⅰ 具切除引物、修复损伤、变异、填补空隙 2 DNA连接酶 催化一个DNA链的5ˊ--磷酸基与另一个DNA链的 3--OHˊ形成 3ˊ，5ˊ--磷酸二酯键 3 拓扑异构酶Ⅱ 该酶兼有内切酶和连接酶的活力，能迅速使DNA链断开 又接上使DNA的松驰态与螺旋态之间发生转变 4 DNA解链酶 能使DNA两条链之间的氢键解开，使复制叉前移 5 单链结合蛋白（SSB） 防止解开的DNA单链重新结合成双链 （二）双链DNA复制的分子机制（要点） 1 拓扑异构酶引进活节产生负超螺旋 2 DNA解链酶将双链解开形成两条单链 3 SSB结合到单链上 4 引物酶催化合成RNA引物（引发过程） 5 DNA聚合酶Ⅲ 催化合成新 DNA的前导链及冈崎片断，由于 DNA聚合酶Ⅲ 只能催化5ˊ→ 3ˊ 的合成，故前导链是连续合 成的，而滞后链则是不连续合成的，即先合成冈崎片断再连接 6 DNA聚合酶Ⅰ 除去引物，修补缺口 7 连接酶 将冈崎片断连接起来，以完成滞后链的合成 （三）DNA聚合酶的校对作用 四 真核细胞DNA的复制（DNA指导下的DNA合成） 复制过程可能与原核生物类似，具体细节上有小差异： 1 真核生物DNA的复制远比大肠杆菌复杂 2 真核生物细胞中，现已发现三种 DNA聚合酶α、β、γ 3 真核细胞中也发现有冈崎片断、；连接酶、RNA引物和 各种有关DNA双螺旋分子解旋的酶和蛋白质 原核生物 冈崎片断长 1000—2000 核苷酸 真核生物 冈崎片断短 100-----200 核苷酸 原核生物 复制叉的移动速度较快 真核生物 复制叉的移动速度较慢 生物细胞DNA复制基本特点 具体总结为7点 五 DNA的损伤与修复 无差错修复： 光复活修复 （高等哺乳动物中不存在） 暗修复： （切除修复） （ 普遍存在） （一）光复活修复 机制：可见光激活了光复活酶，使TT二聚体解聚 （二）暗修复（切除修复） 1 特异的核酸内切酶在损伤部位5ˊ一端邻近的位置切断 DNA单链 2 DNA聚合酶利用完整的互补链为模板在断口处进行局 部的修复合成 3 5ˊ→ 3ˊ核酸外切酶水解除去包括损伤部位在内一小 段DNA单链 4 连接酶将新合成的DNA链与原来的DNA连接 T T UV T T 光复活酶 T T 六 反转录作用（RNA指导的DNA合成） 逆转录由逆转录酶催化 分两步进行 第一步：以RNA为模板合成与RNA互补的DNA，形成RNA-DNA杂化双链 第二步: 核糖核酸酶H水解杂化双链中的RNA链,以新合成的DNA链为模板,合成DNA双链 病毒RNA RNA-DNA 杂交体 病毒RNA转录的DNA链 病毒双链DNA 第二节 RNA的生物合成 一 转录 (DNA指导下的RNA合成) 1.概念:遗传信息由DNA传向RNA的过程 转录以DNA双链中的一条链作为模板,起模板作用的DNA一条 链称模板链(有义链)与之对应的另一条链称编码链(反义链) 不对称转录 转录特点: 方向 5’→3 ’; 不需要引物; 连续合成 ; 催化转录的酶是RNA聚合酶; 原料:NTP 二.RNA聚合酶和蛋白因子 以大肠杆菌为例: RNA聚合酶 = 核心酶(α